轉(zhuǎn)基因構(gòu)建35S啟動(dòng)子-WMVII基因染料法qPCR試劑盒操作方法：

1 確定PCR反應(yīng)液或其他酶促反應(yīng)液的體積。將PCR反應(yīng)液或其他酶促反應(yīng)液轉(zhuǎn)移至一個(gè)新的1.5 ml離心管中，向其中加入等體積溶液BD?；旌暇鶆?。

2 將步驟1所獲溶液置于DNA純化柱中，靜置2min。

3  12,000 rpm離心1min，棄濾液。

注：此時(shí)DNA片段被吸附于DNA純化柱中的硅膠膜上。

若溶液體積大于純化柱容積（800 μl），可分兩次離心。

4 加入500 μl溶液PE。12,000 rpm離心1min，棄濾液。

注：溶液PE初次使用前用無水乙醇按1: 4稀釋，即含80%乙醇。

此步驟的作用是去除硅膠膜上吸附的酶蛋白、核酸引物、dNTP等其他雜質(zhì)，以獲得高質(zhì)量DNA片段。

5 加入500 μl溶液PE。12,000 rpm離心1min，棄濾液。

6  12,000 rpm 離心 3min，以徹底去除純化柱中的液體。

注：此步驟的作用是去除殘留乙醇，避免殘留乙醇影響后續(xù)酶促反應(yīng)。同時(shí)也利于DNA片段的充分溶解。

7 將離心柱置于新的1.5 ml離心管中。向純化柱的中央處，懸空滴加30-100 μl溶液Eluent（60℃預(yù)熱），靜置2min。12,000 rpm 離心1min，管底即為目的DNA片段。貯存于-20℃。

注：溶液Eluent可用無菌雙蒸水代替，但其pH需為8.0-8.5，加入體積視DNA目的片段、用戶對(duì)目的片段濃度要求而定。

產(chǎn)品僅用于科研對(duì)溶液Eluent 60℃預(yù)熱，會(huì)提高提取DNA目的片段的產(chǎn)量。

實(shí)驗(yàn)外包:

1.基因組學(xué)：基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析

2.轉(zhuǎn)錄組學(xué)：microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq

3.蛋白質(zhì)組學(xué)：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM

4.基因檢測(cè)：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR

5.蛋白質(zhì)檢測(cè)：Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA

6.病理檢測(cè)：HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選

7.代謝組學(xué)：GC-MS、LC-MS、NMR

8.細(xì)胞及動(dòng)物模型：原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建

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