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上海聯祖生物科技有限公司
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層粘蛋白α5抗體0.1ml/100μg0.2ml/200μg的制備過程

發表時間:2022-04-11
層粘蛋白α5抗體0.1ml/100μg0.2ml/200μg的制備過程:

1. 免疫原:普通的大分子蛋白,聯祖通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。

2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產時需要用到狗、綿羊、山羊等。

3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采血,家兔、山羊、綿羊可采用采血。

4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。

5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
操作要點

1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;

2.如果氧化反應損傷蛋白質,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯)胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;

3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;

4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天);

5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;

6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。

含錨蛋白重復序列-細胞因子信號抑制物盒蛋白家族17抗體
含錨蛋白重復序列-細胞因子信號抑制物盒蛋白家族12抗體
鈉鉀ATP酶通道蛋白抗體
AGXT2L2蛋白抗體
β淀粉樣蛋白胞內結構域相關蛋白1抗體
錨蛋白重復及SAM結構域蛋白6抗體
二磷酸腺苷核糖基轉移酶3抗體
二磷酸腺苷核糖基轉移酶5抗體
腺苷單磷酸脫氨酶1抗體
紅細胞蛋白Ank1抗體
腺苷酸琥珀酸裂解酶抗體
α1B糖蛋白抗體
載脂蛋白B-mRNA編碼蛋白抗體
凋亡誘導因子3抗體
凋亡蛋白活性因子1相互作用蛋白抗體
凋亡誘導蛋白D抗體
酸性神經鞘磷脂酶抗體
腺嘌呤核苷酸轉運蛋白1抗體
肌萎縮側索硬化2染色體區域候選蛋白8抗體
ATP酶H+轉運溶酶體輔助蛋白2抗體
肝素結合蛋白/陽離子抗菌蛋白37/天青殺素抗體
核突觸蛋白抗體
β-肌動蛋白/β-Actin 抗體(內參抗體)
β淀粉樣肽1-42(C端)/β-Amyloid 1-42 (CT)抗體
β淀粉樣肽1-16/Aβ1-16抗體
β淀粉樣肽1-28/β-Amyloid 1-28抗體
激活素受體2A抗體
水通道蛋白5抗體
β淀粉樣肽(1-40)抗體


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