PLA2磷脂酶A2測試劑盒可見分光光度法操作步驟
發(fā)表時(shí)間:2023-02-09實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進(jìn)行檢測。
改良CCD瓊脂基礎(chǔ) 規(guī)格: 250g 作用: 用于空腸彎曲菌的選擇分離培養(yǎng)(GB、ISO),每100mL基礎(chǔ)培養(yǎng)基需添加1支配套試劑
Bolton肉湯基礎(chǔ) 規(guī)格: 250g 作用: 用于空腸彎曲菌的選擇性增菌(GB),每100mL基礎(chǔ)培養(yǎng)基需添加1支配套試劑(SR0340)
哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基 規(guī)格: 250g 作用: 滅菌后冷至45℃左右時(shí)加入5%脫纖維羊血,用于空腸彎曲菌的培養(yǎng)。(CP、GB、EP、USP)
Skirrow瓊脂配套試劑 規(guī)格: 10支/盒 作用: 每支添加于100mL的 Skirrow瓊脂基礎(chǔ)中
改良CCD瓊脂配套試劑 規(guī)格: 10支/盒 作用: 每支添加于100ml(022212)中配成MLST
Bolton肉湯配套試劑 規(guī)格: 10支/盒 作用: 每支添加于100mL的 Bolton 肉湯基礎(chǔ)中
水解酪蛋白胨(MH)瓊脂 規(guī)格: 250g 作用: 滅菌后冷卻至45℃左右時(shí)加入5%的脫纖維羊血,配成Mueller Hinton 血平板,用于空腸彎曲菌的藥敏試...
布氏肉湯 規(guī)格: 250g 作用: 用于空腸彎曲菌培養(yǎng)及運(yùn)動(dòng)性觀察。(GB、ISO)
Skirrow瓊脂 規(guī)格: 250g 作用: 用于空腸彎曲菌的選擇分離培養(yǎng)(GB、ISO),每100mL基礎(chǔ)培養(yǎng)基需添加2支配套試劑。(SR0330)
改良CCD瓊脂基礎(chǔ) 規(guī)格: 250g 作用: 用于空腸彎曲菌的選擇分離培養(yǎng)(GB、ISO),每100mL基礎(chǔ)培養(yǎng)基需添加1支配套試劑
Bolton肉湯基礎(chǔ) 規(guī)格: 250g 作用: 用于空腸彎曲菌的選擇性增菌(GB),每100mL基礎(chǔ)培養(yǎng)基需添加1支配套試劑(SR0340)
哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基 規(guī)格: 250g 作用: 滅菌后冷至45℃左右時(shí)加入5%脫纖維羊血,用于空腸彎曲菌的培養(yǎng)。(CP、GB、EP、USP)
高氏合成1號(hào)瓊脂培養(yǎng)基 規(guī)格: 250g 作用: 供放線菌培養(yǎng)用。
血平板 (成品培養(yǎng)基) 規(guī)格: 20個(gè)/盒 作用: 用于營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)及溶血試驗(yàn)
哥倫比亞血平板(成品培養(yǎng)基) 規(guī)格: 20個(gè)/盒 作用: 用于一般病原菌的分離培養(yǎng)和溶血性細(xì)菌的鑒別
改良克氏雙糖培養(yǎng)基 規(guī)格: 250g 作用: 用于小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌的鑒定
硝酸鹽蛋白胨水培養(yǎng)基 規(guī)格: 250g 作用: 用于鑒別綠膿桿菌分解硝酸鹽產(chǎn)氣試驗(yàn)
半固體瓊脂 規(guī)格: 250g 作用: 供細(xì)菌動(dòng)力觀察、菌種保存,H抗原位相變異試驗(yàn)等。(美國FDA、SN、GB)
3%氯化鈉三糖鐵瓊脂 規(guī)格: 250g 作用: 用于副溶血性弧菌的生化反應(yīng)。(GB、SN)
血瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ) 規(guī)格: 250g 作用: 加入脫纖維羊血或兔血,制成血瓊脂培養(yǎng)基,用于營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)及溶血試驗(yàn)