MAMDC2蛋白抗體分子標(biāo)記技術(shù)：

（一）原理

當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為殘基,殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。

（二）準(zhǔn)備

1.試劑

經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體；0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5；無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液；100g/L三醋酸；70%乙醇；新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5）；胺T反應(yīng)終止緩沖液；

（三）操作要點(diǎn)

1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行；

2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì)，可將抗體與異硫酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m，并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml；

3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年；

4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天）；

5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低；

6.碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。

Southern Marker DL2000（DIG）（見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品）
Southern Marker DL2000（生物素）（見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品）
Southern Marker Oligo（DIG）（見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品）
Southern Marker Oligo（生物素）（見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品）
Southern專用DNA Marker（DIG）
Southern專用DNA Marker（生物素）
超螺旋DNA分子量標(biāo)準(zhǔn)（DNA marker）
大片段DNA分子量標(biāo)準(zhǔn)（DNA marker）
脈沖電泳Marker(低范圍PFG)（見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品）（停產(chǎn)）
脈沖電泳Marker（Lambda LadderPFG）（見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品）
脈沖電泳Marker（酵母染色體PFG）（見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品）（停產(chǎn)）
核酸沉淀劑及助沉劑
Acryl DNA助沉劑（1 mL)
彩色Acryl DNA助沉劑（1 g)（停產(chǎn)）
超快非醇核酸沉淀劑（100次）
超快非醇核酸沉淀劑（30次）
分子生物學(xué)級(jí)糖原干粉（1g）
分子生物學(xué)級(jí)糖原溶液（1mL）
天凈沙核酸濃縮劑
微量DNA助沉劑
微量RNA助沉劑
微量核酸沉淀劑
核酸純化
96孔板PCR片段純化回收試劑盒（離心法）（1次）
96孔板PCR片段純化回收試劑盒（離心法）（5次）
96孔板PCR片段純化回收試劑盒（真空法）（見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品）
低載量PCR片段純化試劑盒（100次）