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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR3259
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-10
- 更新日期： 2025-01-23
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR3259 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
自養(yǎng)無(wú)枝酸菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒說(shuō)明書(shū) | Amycolata autotrophica | LZR3259 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶(hù)只需提供樣品和待檢測(cè)名稱(chēng)即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品：
毛栓孔菌COL13 (Collagen Type XIII) ELISA Kit拉丁屬名: Trametes hirsuta
北京棒桿菌COL14 (Collagen Type XIV) ELISA Kit拉丁屬名: Corynebacterium pekinense
洋蔥假單胞菌CTX-III (Cross Linked C-telopeptide of Type III Collagen) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas cepacia
糞銹傘EJ/GlyRS (Anti-EJ-Antibody) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
印度拜葉林克氏菌EFNA1 (Ephrin A1) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
釀酒酵母SELE (E-Selectin) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
毛榛畢赤酵母F-Box Protein 2(FBXO2) ELISA Kit 拉丁屬名: Pichia mandshurica
戊糖乳桿菌Flt3 (FMS Like Tyrosine Kinase 3) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus pentosus
7#---2號(hào)(網(wǎng)紋馬勃)GATA1 (GATA Binding Protein 1) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
木霉GATA2 (GATA Binding Protein 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Trichoderma sp.
溶桿菌GATA3 (GATA Binding Protein 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Lysobacter sp.
白金針菇—2號(hào)GATA4 (GATA Binding Protein 4) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
楊爛皮殼蕉孢菌GATA5 (GATA Binding Protein 5) ELISA Kit 用途: 植物病原物，用于該菌種群遺傳學(xué)研究；為該病防治提供依據(jù)
香菇GDI1 (GDP Dissociation Inhibitor 1) ELISA Kit 用途: 試驗(yàn)栽培
間座殼GAP (GTPase Activating Protein) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
自養(yǎng)無(wú)枝酸菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒說(shuō)明書(shū)neurofasciu-155 神經(jīng)束蛋白-155Acr-Bis(40%,37.5:1)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
NGF- Beta 神經(jīng)生長(zhǎng)因子-β(多肽片斷抗原)新夏佛托苷5,7-dihydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)-6-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)tetrahydro-2H-pyran-2-yl]-8-[(2R,3R,4S,5S)-3,4,5-trihydroxytetrahydro-2H-pyran-2-yl]-4H-chromen-4-one (non-preferred name)化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C26H28O14 分 子 量: 564.4921
Ang I/AT1(Angiotensin I) 緊張素I抗原仙鶴草酚B1-Butanone,1-[3,5-bis[[2,6-dihydroxy-4-methoxy-3-methyl-5-(1-oxobutyl)phenyl]methyl]-2,4,6-trihydroxyphenyl]-2-methyl-,(2S)-中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C37H46O12 分 子 量:
NGF-R(p75NTR) 神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體（抗原）多被銀蓮花皂苷R8Raddeanoside R8中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C65H106O30 分 子 量: 1366
AT1R(Angiotensin II Type 1 Receptor) 緊張素Ⅱ-1型受體抗原鳶尾酚酮Iriflophenone對(duì)照藥材 分 子 式: C13H10O5 分 子 量: 246.2155
AT1R/AGTR1(Angiotensin II Type 1 Receptor) 緊張素Ⅱ-1型受體抗原三七素(S)-2-Amino-3-(carboxyformamido)propanoic acid化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C5H8N2O5 分 子 量: 176.12742
NIK，NF-kappaB-Inducing Kinase NFkB誘導(dǎo)的激酶（抗原）鈉單元素溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(200ug/ml)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
