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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR3242
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-10
- 更新日期： 2025-01-23
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR3242 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
嗜水氣單胞菌探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格 | Aeromonas hydrophila | LZR3242 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
季也蒙邁耶氏酵母BMP-1 (Bone Morphogenetic Protein 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Meyerozyma guilliermondii
平田頭菇BMP-10 (Bone Morphogenetic Protein 10) ELISA Kit 用途: 食用、科研
釀酒酵母BMP-15 (Bone Morphogenetic Protein 15) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
短密木霉BMP-6 (Bone Morphogenetic Protein 6) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
粘質(zhì)沙雷氏菌BMPR1A (Bone Morphogenetic Protein Receptor, type IA) ELISA Kit拉丁屬名: Serratia marcescens
枯草芽孢桿菌BMPR2 (Bone Morphogenetic Protein Receptor II) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
白僵菌BSP (Bone Sialoprotein) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
黑曲霉MOG (Myelin Oligodendrocyte Glycoprotein) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus niger
糞腸球菌(糞鏈球菌)MT1E (Metallothionein 1E) ELISA Kit拉丁屬名: Enterococcus faecalis(Streptococcus faecalis)
藤黃微球菌BK (Bradykinin) ELISA Kit拉丁屬名: Micrococcus luteus
枯草芽孢桿菌BNP (Brain Natriuretic Peptide) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
淺黃鏈霉菌MSMβ (Microseminoprotein Beta) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces flaveolus
牛鏈球菌 蘭氏D群BRAK/CXCL14 (Breast and Kidney Expressed Chemokine) ELISA Kit拉丁屬名: bovis
大腸埃希菌BRCA1 (Breast Cancer Susceptibility Protein 1) ELISA Kit拉丁屬名: coli
釀酒酵母BRCA2 (Breast Cancer Susceptibility Protein 2) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
嗜水氣單胞菌探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格Cytochrome C 細(xì)胞色素 C（抗原）27-羥基膽固醇27-Hydroxycholesterol中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C27H46O2 分 子 量: 402.65294
ADRB3/ Beta3-AR ( Beta3-adrenergic receptor) 腎上腺素能受體β3蒲公英賽酮27-Norolean-14-en-3-one,13-methyl-, (13a)-對(duì)照藥材 分 子 式: C30H48O 分 子 量: 424.70152
Cytomegalovirus (CMV)PP65 細(xì)胞巨化病毒(多肽)5-甲基基-苦參醇C化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: 分 子 量:
DDC (DOPA decarboxylase) 多巴胺脫羧酶（抗原）Acr-Bis(30%:1.6%，活性炭處理)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
EGFR- V III 人表皮生長因子受體-8（多肽片斷抗原）鹽酸野靛堿6-Aminopyrimidin-2(1H)-one hydrochloride中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C4H5N3O.HCl 分 子 量: 147.56294
Alpha-AF/ Alpha-Afa(alpha-L-arabinofuranosidase) α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶抗原大豆苷Daidzin中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C21H20O9 分 子 量: 416.38
SCCA peptide 抗原燈臺(tái)樹次堿Curan-17-oic acid,2,16-didehydro-12,19- dihydroxy-,methyl ester,(19S)- 對(duì)照藥材 分 子 式: C20H24N2O4 分 子 量: 356.41556
