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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3272
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-10
- 更新日期： 2025-01-23
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3272 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
節(jié)菱孢霉屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商 | Arthrinium spp. | LZR3272 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
RisungbinellaFABP5 (Fatty Acid Binding Protein 5, Epidermal ) ELISA Kit拉丁屬名: Risungbinella pyongyangensis
枯草芽孢桿菌枯草亞種VEGFR1/FLT1 (Vascular Endothelial Growth Factor Receptor 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus subtilis subsp. subtilis
鏈格孢ET (Epitestosterone) ELISA Kit拉丁屬名: Alternaria Alternata
灰藍(lán)毛霉PKM2 (Pyruvate Kinase, Muscle) ELISA Kit拉丁屬名: Mucor griseo
草假單胞菌PDH E1 (Pyruvate Dehydrogenase E1) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas graminis
異常漢遜酵母異常變種PDHα (Pyruvate Dehydrogenase Alpha) ELISA Kit 拉丁屬名: Hansenula anomala var. anomala
黃柄曲霉PDK4 (Pyruvate Dehydrogenase Kinase Isozyme 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus flavipes
毛殼(菌)科PDP (Pyruvate Dehydrogenase Phosphatase) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
腫紅皮孔菌VIM (Vimentin) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
釀酒酵母VTN (Vitronectin) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
梨形卷枝霉PPOX (Protoporphyrinogen Oxidase) ELISA Kit拉丁屬名: Helicostylum piriforme
裂孔平伏菌PRB1 (Basic Salivary Proline Rich Protein 1) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
海洋桿菌FOXC1 (Forkhead Box Protein C1) ELISA Kit拉丁屬名: Pontibacter sp.
嗜堿假單胞菌FOXO1 (Forkhead Box Protein O1) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas alcaliphila
高加索鏈霉菌FOXO2 (Forkhead Box Protein O2) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces ciscaucasicus
節(jié)菱孢霉屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商Alpha-Synuclein 核突觸蛋白（抗原）球松素查爾酮1-(2,6-Dihydroxy-4-methoxyphenyl)-3-phenylprop-2-en-1-one對照藥材 分 子 式: C16H14O4 分 子 量: 270.27996
Alpha-Synuclein 核突觸蛋白（抗原）蘇丹紅ⅡSudan II中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C18H16N2O 分 子 量: 276.33
CA15-3 peptide 相關(guān)抗原抗原圓錐定 A1H-Indole-3-butanoic acid,R-methyl-,methyl ester,(RR)- 對照藥材 分 子 式: 分 子 量:
Substance P Receptor (Neurokinin receptor1;Tachykinin receptor1) P物質(zhì)受體（抗原）五-O-乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖beta-D-Glucose pentaacetate中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C16H22O11 分 子 量: 390.33928
p-Caldesmon(phosphor-Ser789) 磷酸化鈣介質(zhì)素抗原原兒茶醛3,4-Dihydroxybenzaldehyde中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C7H6O3 分 子 量: 138.12074
NK-2R peptide 神經(jīng)激肽A受體（多肽抗原）6''-丙二酸沙苑子苷單酯中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: 分 子 量:
Calpain 1 鈣蛋白酶（多肽）沙紙寧CPhenol,2-[3-(3-hydroxy-4-methoxyphenyl)- propyl]-5-methoxy- 對照藥材 分 子 式: C17H20O4 分 子 量: 288.3383
