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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
短螺旋體通用探針法熒光定量PCR試劑盒
  • 品牌:聯祖
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:LZR3361
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-11
  • 更新日期: 2025-01-23
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 聯祖
貨號 LZR3361
用途 公司產品僅用于科研
包裝規格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環步驟

溫度

時間

循環數

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

 

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。

產品名稱

英文名稱

貨號

短螺旋體通用探針法熒光定量PCR試劑盒

Brachyspira spp.

LZR3361


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

以下列是公司正在熱銷的產品:

紅色紅曲TGF-β1 (Transforming Growth Factor β1) ELISA Kit 拉丁屬名: Monascus  ruber

平菇(江都156)CRP (C-Reactive Protein) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

Pseudomonas entomophila L48INS (Insulin) ELISA Kit規格: 冰袋泡沫盒快遞

產紫青霉I-TAC (Interferon Inducible T-Cell Alpha Chemoattractant) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium purpurogenum

植物乳桿菌LH (Luteinizing Hormone) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus  plantarum

椿象紅球菌GH (Growth Hormone) ELISA Kit 拉丁屬名: Rhodococcus rhodnii

沙場鏈霉菌REN (Renin) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces arenae

糞腸球菌CIC (Circulating Immune Complexes) ELISA kit拉丁屬名: faecalis

短密青霉CASP8 (Caspase 8) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium brevicompactum

交鏈孢OxLDL (Oxidized Low-Density Lipoprotein) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

巨大芽孢桿菌Aβ40 (Amyloid Beta 40) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus  megaterium

匯合海桿菌Aβ42 (Amyloid Beta 42) ELISA Kit拉丁屬名: Marinobacter confluentis

釀酒酵母TPS (Tryptase) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae

粉紅擲孢酵母MMP-10 (Matrix Metalloproteinase 10) ELISA Kit拉丁屬名: Sporobolomyces roseus

MarisediminicolaMMP-12 (Matrix Metalloproteinase 12) ELISA Kit拉丁屬名: Marisediminicola  antarctica
短螺旋體通用探針法熒光定量PCR試劑盒 RhoA (RhoA protein)  RhoA抗原奧洛波爾Isoflavone-3-4-5-7-tetrahydroxy--7CI-8CI-對照藥材 分 子 式: C15H10O6 分 子 量: 286.2363

Rho C(Ras homolog gene family member C)  RhoC抗原4,4'-二氨基二苯砜4-Aminophenyl sulfone化學標準品 分 子 式: C12H12N2O2S 分 子 量: 248.3

RNF148(Ring finger protein 148)  環指蛋白148抗原瓜子金皂苷XXXIPolygalasaponin XXXI;Onjisaponin F化學標準品 分 子 式: C75H112O36 分 子 量: 1589.67018

ROCK1 (Rho-associated coiled-coil containing protein kinase 1)  Rho相關蛋白激酶1抗原靈芝醇 BLanosta-7,9(11),24-triene-3,26-diol,(3b,24E)-對照藥材 分 子 式: C30H48O2 分 子 量: 440.70092

ROCK2 (Rho-associated coiled-coil containing protein kinase 2)  Rho相關蛋白激酶2抗原叔丁基對苯二酚tert-Butylhydroquinone中藥標準品  分 子 式: C10H14O2 分 子 量: 166.21696

RXR Alpha(retinoid-X receptor alpha)  核受體RXRα抗原長春堿vinblastine中藥標準品  分 子 式: C46H58N4O9 分 子 量: 810.9856

S6PDH(NADP sorbitol-6-phosphate dehydrogenase)  6-磷酸山梨醇脫氫酶抗原胡桃醌5-Hydroxy-p-naphthoquinone中藥標準品  分 子 式: C10H6O3 分 子 量: 174.15

 


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