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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3369
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-11
- 更新日期： 2025-01-23
| 產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3369 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
綿羊布魯氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒 | Brucella ovis | LZR3369 |
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
凍干補體BMP-7 (Bone Morphogenetic Protein 7) ELISA Kit規(guī)格: 1ml/200頭份
美澳型核果褐腐病菌BMP8B (Bone Morphogenetic Protein 8B) ELISA Kit 拉丁屬名: Monilinia fructicola
PaenibacillusBMPR1A (Bone Morphogenetic Protein Receptor 1A) ELISA Kit拉丁屬名: Paenibacillus sp.
大腸埃希菌BMPR2 (Bone Morphogenetic Protein Receptor II) ELISA Kit拉丁屬名: coli
大腸埃希菌BALP (Bone Alkaline Phosphatase) ELISA Kit拉丁屬名: coli
大腸埃希菌CASP1 (Caspase 1) ELISA Kit拉丁屬名: coli
黃硬皮馬勃BK (Bradykinin) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
柱孢綠僵菌BDNF (Brain Derived Neurotrophic Factor) ELISA Kit拉丁屬名: Metarhizium
美麗胡枝子根瘤菌BNP (Brain Natriuretic Peptide) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizobium sp.
棉阿舒囊霉BRAK (Breast And Kidney Expressed Chemokine) ELISA Kit 用途: 產(chǎn)核黃素
綠色木霉CA724 (Tumor Marker CA724) ELISA Kit拉丁屬名: Trichoderma viride
大腸埃希菌Ca-ATPase (Calcium ATPase) ELISA Kit 拉丁屬名: coli
釀酒酵母VE-Cadherin (Vascular Endothelial Cadherin) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
弓形蟲(GTS－2株)E-Cad (E-Cadherin) ELISA Kit拉丁屬名: gondii
灰樹花-4NCAD (Neural Cadherin) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
綿羊布魯氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒 STAT5(signal transducers and activators of transduction5) 信號轉(zhuǎn)導和轉(zhuǎn)錄激活因子5(STAT5)抗原鳳仙萜四醇苷Fb-D-Glucopyranoside,(1R,2S,4aR,4bR,6'R,6aR,7R,8S,10aR,10bR,12aS)-6'-[(1R)-2-(b-D-glucopyranosyloxy)-1-methylethyl]octadecahydro-1-hydroxy-7-(hydroxymethyl)-4a,4b,7,10a-tetramethylspiro[chrysene-2(1H),3'(4'H)-[2H]pyran]-8-yl2-O-b-D-xylopyranosyl- (9CI)化學標準品 分 子 式: C47H80O19 分 子 量:
STAT6(signal transducers and activators of transduction 6) 信號轉(zhuǎn)導和轉(zhuǎn)錄激活因子6抗原紫草氰苷Acetonitrile,2-[(4R,5S,6S)-6-(b-D-glucopyranosyloxy)-4,5-dihydroxy-2-cyclohexen-1-ylidene]-,(2Z)-中藥標準品 分 子 式: C14H19NO8 分 子 量: 329.30256
SUMO 類泛素蛋白RTA-402Oleana-1,9(11)-dien-28-oicacid, 2-cyano-3,12-dioxo-, methyl ester化學標準品 分 子 式: C32H43NO4 分 子 量: 505.68812
Gamma-Synuclein/SNCG 核突觸蛋白-γ抗原2-O-乙酰山椒子烯酮中藥標準品 分 子 式: 分 子 量:
phospho-Tau protein (pThr489) peptide 磷酸化微管相關(guān)蛋白多肽24-乙酰澤瀉醇FAlisol F 24-acetate中藥標準品 分 子 式: 分 子 量:
MAP-2(microtubule associated protein 2) 微管相關(guān)蛋白2抗原黃柏呈Lanost-7-en-3-one,23,24-dihydroxy-25-methoxy-, (13a,14b,17a,20S,23R,24S)-對照藥材 分 子 式: C31H52O4 分 子 量:
MAP1A/Mtap1a(microtubule associated protein 1A) 微管相關(guān)蛋白1A抗原氯化鈣溶液(1mol/L,無菌)標準滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
