- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào):LZR3378
- 價(jià)格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-11
- 更新日期: 2025-01-23
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號(hào) | LZR3378 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
伯克氏菌通用探針?lè)晒舛縋CR試劑盒規(guī)格 | Burkholderia spp. | LZR3378 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
孢囊桿菌C4a (Complement Component 4a) ELISA Kit拉丁屬名: Cystobacter SP.
腸膜明串珠菌C* (Complement Component *) ELISA Kit拉丁屬名: Leuconostoc mesenteroides
深海芽孢桿菌CTGF (Connective Tissue Growth Factor) ELISA Kit拉丁屬名: Thalassobacillus sp.
果生鏈核盤菌CX26 (Connexin 26) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
抗生鏈霉菌CX31 (Connexin 31) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces antibioticus
谷氨酸棒桿菌CX37 (Connexin 37) ELISA Kit 拉丁屬名: Corynebacterium glutamicum
節(jié)桿菌屬CX40 (Connexin 40) ELISA Kit 拉丁屬名: Arthrobacter pascens
黑根須腹菌CX43 (Connexin 43) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
平菇CNTN1 (Contactin 1) ELISA Kit 用途: 食用、藥用
螺卷毛殼CNTN2 (Contactin 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Chaetomium cochliodes
鮮綠青霉CNTN3 (Contactin 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Penicillium viridicatum
釀酒酵母CORT (Corticosterone) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
米曲霉SIRT1 (NAD-dependent protein deacetylase sirtuin-1) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus oryzae
釀酒酵母CRH (Corticotropin Releasing Hormone) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
日勾維腸桿菌C-P (C-Peptide) ELISA Kit拉丁屬名: Enterobacter gergoviae
伯克氏菌通用探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒規(guī)格VEGFR2 內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2Tesetaxel2-Pyridinepropanoic acid, b-[[(1,1-dimethylethoxy)carbonyl]amino]-3-fluoro-a-hydroxy-,(2aS,2bR,3S,4S,6S,8aR,10S,11aS,11bR,13aR)-2a-(acetyloxy)-3-(benzoyloxy)-10-[(dimethylamino)methyl]-2a,2b,3,4,5,6,8a,11a,11b,12,13,13a-dodecahydro-4-hydroxy-7,11b,14,14-tetramethyl-4,8-methano-2H-oxeto[3'',2'':3',4']benzo[1',2':3,4]cyclodeca[1,2-d][1,3]dioxol-6-ylester, (aR,bS)-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C46H60N3O13F 分 子 量: 881.979300000001
sVEGFR2 可溶性內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2肉豆蔻木脂素Myrislignan中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C29H22N5O4F 分 子 量: 523.51448
VEGFR-3/FLt-4 內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體-3(多肽)Hederacolchiside EOlean-12-en-28-oicacid, 3-[(O-6-deoxy-a-L-mannopyranosyl-(1®2)-O-[b-D-glucopyranosyl-(1®4)]-a-L-arabinopyranosyl)oxy]-, O-6-deoxy-a-L-mannopyranosyl-(1®4)-O-b-D-glucopyranosyl-(1®6)-b-D-glucopyranosyl ester, (3b)-中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C65H106O30 分 子 量:
VEGFR-3(Vascular Epidemal growth factor receptor-3) 內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體-3抗原3-咖啡酰奎尼酸甲酯3-caffeoylquinic acid methyl ester化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C17H20O9 分 子 量: 368.335
VWF (Von Willebrand Factor) 假性因子/性因子抗原雷公藤三萜酸 AAbrusgenic-acid對(duì)照藥材 分 子 式: C30H48O4 分 子 量:
Wnt1 信號(hào)通路Wnt1抗原磷酸川芎嗪Lilopristone中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C29H37NO3 分 子 量: 447.60898
WWOX (WW domain-containing oxidoreductase) 包含氧化還原酶的WW域抗原5-羥基馬鞭草苷Hastatoside中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C17H24O11 分 子 量: 404.366