- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號:LZR3391
- 價格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-11
- 更新日期: 2025-01-23
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號 | LZR3391 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
耳念珠菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書 | Candida auris | LZR3391 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
釀酒酵母GPI (Glucose 6 Phosphate Isomerase) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
米根霉GUSb (Glucuronidase, Beta) ELISA Kit 用途: 產(chǎn)糖化酶
枯草芽孢桿菌枯草亞種GCLM (Glutamate Cysteine Ligase, Modifier Subunit) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus subtilis subsp. subtilis
美澳型核果褐腐病菌GAD2 (Glutamate Decarboxylase 2, Acid) ELISA Kit 拉丁屬名: Monilinia fructicola
亞拉巴馬全緣孔菌GDH/GLDH (Glutamate dehydrogenase) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
污黑腐皮殼GAD-Ab (Glutamic Acid Decarboxylase Autoantibody) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
食腺嘌呤芽生葡萄孢酵母OXB (Orexin B) ELISA Kit拉丁屬名: Blastobotrys adeninivorans
根瘤菌HB (Hemoglobin) ELISA Kit用途: 與紫穗槐共生固氮
細(xì)鏈格孢GR (Glutathione Reductase) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
黃赭色鏈霉菌GSTa1 (Glutathione S Transferase Alpha 1) ELISA Kit 用途: 5406的誘變菌株可 抗生素菌肥
大腸埃希氏菌GSTo1 (Glutathione S Transferase Omega 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Escherichia coli
嘴突凸臍蠕孢GSTt1 (Glutathione S Transferase Theta 1) ELISA Kit 用途: 研究
貝倫格葡萄座腔菌梨生?;?/span>GSTt2 (Glutathione S Transferase Theta 2) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
黃綠木霉HbA1C (Glycosylated Hemoglobin/Hemoglobin A1c) ELISA Kit拉丁屬名: Trichoderma aureoviride
不產(chǎn)色鏈霉菌PYGB (Glycogen Phosphorylase, Brain) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces achromogenes
耳念珠菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書HHV8/ORF50(Human herpesvirus 8 type P) 人類病毒8抗原α-常春藤皂苷ALPHA-HEDERIN化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C41H66O12 分 子 量: 764.98
HHV8/ORF K2/vIL-6(Human herpesvirus 8) 人類病毒8抗原丁香三環(huán)烷二醇3a,7-Methano-3aH-cyclopentacyclooctene-3,6-diol,decahydro-1,1,7-trimethyl-, (3S,3aS,6R,7R,9aS)-對照藥材 分 子 式: C15H26O2 分 子 量:
HIF-1Alpha 缺氧誘導(dǎo)因子1α 多肽1-脫羧-3-氧代茶酸1-Decarboxy-3-oxo-ceanothic-acid對照藥材 分 子 式: C29H44O3 分 子 量: 440.65786
histone H3-like protein 組蛋白H3樣蛋白多肽派利文堿Vobasan-17-oic acid,4-demethyl-3-oxo-, methyl ester中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C20H22N2O3 分 子 量: 338.40028
histone H3-like protein 組蛋白H3樣蛋白(C端多肽)長春西汀vinpocetine中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C22H26N2O2 分 子 量: 350.45
histone H3-like protein 組蛋白H3樣蛋白(N端多肽)斷血流皂苷AClinodiside A中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C48H78O19 分 子 量: 959.121520000001
HIV-1(human immunodeficiency virus type 1) 病毒-1/人類病毒1型(抗原)Tris-硼酸電泳粉劑(5×TBE)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量: