|
- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3393
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-11
- 更新日期： 2025-01-23
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3393 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
克柔念珠菌探針法熒光定量PCR試劑盒 | Candida krusei | LZR3393 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
大腸埃希菌GDF7 (Growth Differentiation Factor 7) ELISA Kit 拉丁屬名: coli
DeinococcusGDF9 (Growth Differentiation Factor 9) ELISA Kit 拉丁屬名: Deinococcus sp.
哈茨木霉GDF10 (Growth Differentiation Factor 10) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
淡紫擬青霉GDF11 (Growth Differentiation Factor 11) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
鐮刀菌GDF15 (Growth Differentiation Factor 15) ELISA Kit 用途: 教學(xué)科研
發(fā)酵乳桿菌Grb2 (Growth Factor Receptor Bound Protein 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Lactobacillus fermentum
球毛殼Grb7 (Growth Factor Receptor Bound Protein 7) ELISA Kit 拉丁屬名: Chaetomium globosum
乳桿菌屬Grb10 (Growth Factor Receptor Bound Protein 10) ELISA Kit 拉丁屬名: Lactobacillus sp.
黃色籃狀菌Grb14 (Growth Factor Receptor Bound Protein 14) ELISA Kit 拉丁屬名: Talaromyces flavus
果生鏈核盤菌GH2 (Growth Hormone 2) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
浸麻類芽胞桿菌GHRH (Growth Hormone Releasing Hormone) ELISA Kit用途: 產(chǎn)酮、乙
草酸青霉CAM (Calmodulin) ELISA Kit 拉丁屬名: Penicillium oxalicum
黃曲霉HP (Haptoglobin) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus flavus
釀酒酵母HSF1 (Heat Shock Factor 1) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
腸桿菌HSP-20 (Heat Shock Protein 20) ELISA Kit用途: 微生物肥料
克柔念珠菌探針法熒光定量PCR試劑盒 HSP-90 Beta (heat sock protein-90 Beta) 熱休克蛋白-90β （抗原）12,13-去氫苦參堿12,13-didehydromatridin-15-one化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C15H22N2O 分 子 量: 246.34798
IASPP(inhibitory member of the ASPP family) 細(xì)胞凋亡ASPP家族的另一個成員(抗原)澳洲茄胺solasodine中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C27H43NO2 分 子 量: 413.64
CD54/ICAM-1 細(xì)胞間粘附分子-1HEPES緩沖液(1×HMF,無鎂)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
IL-1 Beta(Interleukin-1 Beta) 白介素1β（白細(xì)胞介素-1β）(多肽抗原)Tricine-SDS-PAGE凝膠配制試劑盒標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
IL1RAPL1 (Interleukin 1 receptor accessory protein-like 1) 白介素受體相關(guān)蛋白樣1前體蛋白（抗原）蔗糖咪唑溶液(1.65mol/L,pH7.0)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
IL-6(Interleukin-6) 白介素6（白細(xì)胞介素-6）(多肽抗原)黃芪甲苷ASTRAGALOSIDE中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C41H68O14 分 子 量: 784.97
IL-10(Interleukin-10) 白介素10（白細(xì)胞介素-10）(抗原)柚皮素-7-O-葡萄糖醛酸苷Naringenin-7-O-glucuronide 中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C21H20O11 分 子 量: 448.3769
