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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR3399
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-11
- 更新日期： 2025-01-23
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR3399 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
犬病毒探針法熒光定量PCR試劑盒說明書 | Canine Herpes Virus | LZR3399 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
*銀耳、白木耳IAA (Insulin Autoantibodies) ELISA Kit拉丁屬名: Tremella fuciformis Berk.
羽扇豆根瘤菌INSL5 (Insulin Like Protein 5) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
香菇INSR-β (Insulin Receptor Beta Subunit) ELISA Kit拉丁屬名: Lentinula edodes
阿爾及利亞擬盤多毛孢IGF-2 (Insulin Like Growth Factor 2) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
孟氏假單胞菌IGFBP-1 (Insulin-Like Growth Factor Binding Protein 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudomonas mandelii
新月彎孢霉IGFBP-2 (Insulin-Like Growth Factor Binding Protein 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Cochliobolus lunatus
矮棒曲霉IGFBP-4 (Insulin-Like Growth Factor Binding Protein 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus clavatonanicus
栗疫菌IGFBP-6 (Insulin-Like Growth Factor Binding Protein 6) ELISA Kit 拉丁屬名: Cryphonectria parasitica
丁香鏈霉菌I-PTH (intact Parathormone) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces lilacinus
大腸埃希氏菌ICAM-1 (intercellular adhesion molecule 1) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
腸沙門氏菌亞種ICAM-2 (intercellular adhesion molecule 2) ELISA Kit拉丁屬名: Salmonella enterica subsp. enterica
脫葉鏈霉菌ICAM-3 (intercellular adhesion molecule 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces exfoliates
運(yùn)動(dòng)發(fā)酵單胞菌IFN-α (Interferon Alpha) ELISA Kit拉丁屬名: Zymomonas mobilis
亞美尼亞固氮菌FOXO1 (Forkhead Box Protein O1) ELISA Kit拉丁屬名: Azotobacter armeniacus
戊糖乳桿菌IFI16/p16 (Interferon-inducible Protein 16) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus pentosus
犬病毒探針法熒光定量PCR試劑盒說明書NR2A (Glutamate receptor2A) 谷氨酸受體（N端抗原）異鼠李素-3-O-新橙皮苷4H-1-Benzopyran-4-one,3-[[2-O-(6-deoxy-a-L-mannopyranosyl)-b-D-glucopyranosyl]oxy]-5,7-dihydroxy-2-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)- 中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C28H32O16 分 子 量: 624.54408
NRP-1(neuropilin-1) 神經(jīng)纖毛蛋白-1(抗原)洋川芎內(nèi)酯I1(3H)-Isobenzofuranone,3-butylidene-4,5,6,7-tetrahydro-6,7-dihydroxy-, (3Z,6R,7R)-rel-中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C12H16O4 分 子 量: 224.25304
NRP-2(neuropilin-2) 神經(jīng)纖毛蛋白-2（抗原）松蘿酸Usnic acid中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C18H16O7 分 子 量: 344.31
NSBP1(Nucleosome-binding protein 1) 核小體結(jié)合蛋白1(抗原)土木香內(nèi)酯Alantolactone中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C15H20O2 分 子 量: 232.32
NTP，Neurual thread protein 神經(jīng)絲蛋白（抗原）檸檬酸—檸檬酸鈉緩沖液(0.1mol/L,pH3.0-6.6)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
OAT-1 (Organic anion transporter 1)human 陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1(人源）(-)-表松脂酚Phenol,4,4'-[(1R,3aS,4S,6aS)-tetrahydro-1H,3H-furo[3,4-c]furan-1,4-diyl]bis[2-methoxy-(9CI)化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C20H22O6 分 子 量:
OAT-1 (Organic anion transporter 1)mouse、rat 陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1（大、小鼠同源：人源見bs-0606P）16-貝殼杉烯-2,6,15-三醇16-Kaurene-2,6,15-triol對(duì)照藥材 分 子 式: C20H32O3 分 子 量: 320.46628
