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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR3407
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-11
- 更新日期： 2025-01-22
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR3407 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
捻轉(zhuǎn)毛細(xì)線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒說明書 | Capillaria contorta | LZR3407 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
魯毛霉NXF1 (Nuclear RNA Export Factor 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Mucor rouxianus
大腸埃希氏菌NUP35 (Nucleoporin 35kDa) ELISA Kit 拉丁屬名: Escherichia coli
單格孢NUP37 (Nucleoporin 37kDa) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
大腸埃希菌NUP50 (Nucleoporin 50kDa) ELISA Kit 拉丁屬名: coli
丘陵假絲酵母NUP85 (Nucleoporin 85kDa) ELISA Kit 拉丁屬名: Candida colliculosa
釀酒酵母NUP98 (Nucleoporin 98kDa) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
昆明腐霉NUP107 (Nucleoporin 107kDa) ELISA Kit 拉丁屬名: Pythium kunmingense
瑞士乳桿菌NUP133 (Nucleoporin 133kDa) ELISA Kit 拉丁屬名: Lactobacillus helveticus
產(chǎn)蛋下降綜合征病毒NUP153 (Nucleoporin 153kDa) ELISA Kit 拉丁屬名: Egg drop syndrome virus
毛革蓋菌NUP155 (Nucleoporin 155kDa) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
尖孢鐮孢NUP160 (Nucleoporin 160kDa) ELISA Kit 拉丁屬名: Fusarium oxysporum
葡萄座腔菌屬NUP188 (Nucleoporin 188kDa) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
毛霉NUP205 (Nucleoporin 205kDa) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
淺藍(lán)灰曲霉NUP214 (Nucleoporin 214kDa) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus caesiellus
BacillusOBTF1 (Octamer Binding Transcription Factor 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus sp.
捻轉(zhuǎn)毛細(xì)線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒說明書Tyrosinase 酪氨酸酶(多肽抗原)(S型)人參皂苷Rh2Ginsenoside Rh2中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C36H62O8 分 子 量: 622.87
OAT4L又稱URAT1 (Urate Transporter 1) 尿酸鹽重吸收轉(zhuǎn)運(yùn)子1 (抗原)異苦參酮2'-methoxy-5,7,4'-trihydroxy-8-lavandulylflavanone化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C26H30O6 分 子 量: 438.5128
VAP1(vascular adhesion protein 1) 粘附蛋白1（多肽抗原）連翹苷phillyrin中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C27H34O11 分 子 量: 534.55
Vimentin 波形蛋白（抗原）丹參二醇A(6S)-6,7,8,9-Tetrahydro-6-hydroxy-6-hydroxymethyl-1-methylphenanthro[1,2-b]furan-10,11-dione化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C18H16O5 分 子 量: 312.31664
VSIG4 (V-set and immunoglobulin domain-containing protein 4) VSIG4 T淋巴細(xì)胞負(fù)調(diào)節(jié)蛋白之一（抗原）石杉?jí)A甲Huperzine A化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C15H18N2O 分 子 量: 242.31622
WNK4(Ser/Thr-protein kinase WNK4; protein kinase with no lysine 4; protein kinase, lysine –dficient 4) 一種新的絲氨酸/蘇氨酸激酶家族成員的基因WNK4（多肽抗原）丹參酸甲酯化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: 分 子 量:
ZNF300 (zinc finger protein ZNF300)- middle 鋅指蛋白300(抗原)3-O-阿魏酰奎尼酸(1S,3S,4S,5S)-1,3,4-trihydroxy-5-{[(2E)-3-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)prop-2-enoyl]oxy}cyclohexanecarboxylic acid化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C17H20O9 分 子 量: 368.3353
