- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào):LZR3410
- 價(jià)格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-12
- 更新日期: 2025-01-22
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號(hào) | LZR3410 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
客戶(hù)只需提供樣品和待檢測(cè)名稱(chēng)即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
山羊RT-腦脊髓炎病毒探針?lè)晒舛縋CR試劑盒規(guī)格 | Caprine Arthritis-encephalitis Virus(CAEV)-(MVV) | LZR3410 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn);
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品:
卡坦正青霉PRF1 (Perforin 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Penicillium katangense
摩洛哥芽孢桿菌PMP3 (Peroxisomal Membrane Protein 3) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
熱帶假絲酵母PPAR-γ (Peroxisome Proliferator-activated receptor γ) ELISA Kit拉丁屬名: Candida tropicalis
發(fā)狀孢囊游動(dòng)放線(xiàn)菌PPAR-α (Peroxisome Proliferators-activator Receptors alpha) ELISA Kit拉丁屬名: Actinoplanes capillaceus
秦氏蜜環(huán)菌PT-IgA (Pertussis virus IgA) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
灰耳擔(dān)布勒酵母PI Ab-IgG/IgM (phosphatidylinositol antibody IgG/IgM) ELISA Kit 拉丁屬名: Auriculibuller fuscus
巴氏醋桿菌羅旺亞種PS (Phosphatidylserine) ELISA Kit拉丁屬名: Acetobacter pasteurianus subsp. lovaniensis
傘枝犁頭霉P-PKC (Phospho Protein Kinase C) ELISA Kit拉丁屬名: Absidia corymbifera
沙漠畢赤酵母pERK (Phospho-Extracellular Signal-Regulated Kinase) ELISA Kit拉丁屬名: Pichia deserticola
黑曲霉PI3K2a (Phosphoinositide 3 Kinase 2a) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus niger
葡萄座腔菌PLA1 (Phospholipase A1) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
芽孢桿菌屬PLAA (Phospholipase A1 Activating Protein) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus sp.
短芽孢桿菌LDLR (Low Density Lipoprotein Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus pumilus
仙臺(tái)鏈霉菌PLCg1 (Phospholipase C Gamma 1) ELISA Kit 用途: 產(chǎn)生代謝產(chǎn)物具有抑菌活性
阪崎克羅諾桿菌PI3K (Phosphotylinosital 3 kinase) ELISA Kit拉丁屬名: Cronobacter sakazakii
山羊RT-腦脊髓炎病毒探針?lè)晒舛縋CR試劑盒規(guī)格Melamine/OVA(ovalbumin) 三聚氰胺與雞卵白蛋白偶聯(lián)物Mg-ATP溶液(10mmol/L,pH7.4)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
chloramphenicol/BSA 氯霉素偶聯(lián)牛血清白蛋白土貝母苷乙TubeiMoside II中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: 分 子 量:
chloramphenicol/OVA 氯霉素偶聯(lián)雞卵白蛋白蛋白銀線(xiàn)草醇 DPropanoic acid,2-[(1aR,1bS,2R,4aR,4bS,8aS,9R,9aS,10aR,10bS,10cS,11bS)-9-[(acetyloxy)methyl]-1a,1b,2,3,4a,6,8,8a,9,9a,10,10a,10b,10c,11,11b-hexadecahydro-2-hydroxy-7-(hydroxymethyl)-1b,10b-dimethyl-3,6-dioxocyclopropa[4,5]cyclopropa[4',5']cyclopent[1',2':7,8]acephenanthryleno[10a,10-b]furan-4(1H)-ylidene]-,methyl ester, (2Z)-對(duì)照藥材 分 子 式: C33H38O9 分 子 量:
Gentamicin/BSA 慶大霉素偶聯(lián)牛血清白蛋白5,7-二乙酰氧基黃酮4-Oxo-2-phenyl-4H-chromene-5,7-diyl diacetate對(duì)照藥材 分 子 式: C19H14O6 分 子 量: 338.31086
Gentamicin/OVA 慶大霉素偶聯(lián)雞卵白蛋白辛辣內(nèi)酯ASpiro[furo[2',3':5,6]cyclohepta[1,2-b]pyran-6(2H),6'(1'aH)-[5H]oxireno[4,5]cyclohepta[1,2-b]furan]-2,5'-dione,7-acetyl-2',3,3',3'a,3a,4,4a,6'a,7',7'a,8a,9,10,10a-tetradecahydro-8a-hydroxy-2',9-dimethyl-3-methylene-1'a-[(1E)-3-oxo-1-buten-1-yl]-,(1'aR,2'R,3'aS,3aR,4aR,6R,6'aR,7'aR,8aR,9S,10aR)-中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C29H34O9 分 子 量:
Tetracycline/BSA 四環(huán)素偶聯(lián)牛血清白蛋白曲克蘆丁trihydroxyethylrutin中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C33H42O19 分 子 量: 742.68
Gentamicin/FITC 熒光素標(biāo)記慶大霉素漆黃素; 紫鉚素7,3,4-Trihydroxyflavanone化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C15H12O5 分 子 量: 272.25278