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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
反芻獸考德里氏體探針法熒光定量PCR試劑盒供應商
  • 品牌:聯祖
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:LZR3480
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-12
  • 更新日期: 2025-01-22
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 聯祖
貨號 LZR3480
用途 公司產品僅用于科研
包裝規格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環步驟

溫度

時間

循環數

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

 

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。

產品名稱

英文名稱

貨號

反芻獸考德里氏體探針法熒光定量PCR試劑盒供應商

Cowdria ruminantium

LZR3480


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

以下列是公司正在熱銷的產品:

構巢曲霉OFQ/N (Orphanin FQ/Nociceptin) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus nidulans

李季倫氏環桿菌GROβ (Growth Regulated Oncogene Beta) ELISA Kit拉丁屬名: Cyclobacterium lianum

紫色游動放線菌GROγ (Growth Regulated Oncogene Gamma) ELISA Kit拉丁屬名: Actinoplanes violaceus

藍綠小四孢菌OSCAR (Osteoclast Associated Receptor) ELISA Kit用途: 代謝產物具有活性。

根瘤菌ODF (Osteoclast Differentiation Factor) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

百脈根中間根瘤菌OSF (Osteoclast Stimulating Factor 1) ELISA Kit拉丁屬名: Mesorhizobium  loti

黑曲霉ON (Osteonectin) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus niger

納西桿菌屬OPN (Osteopontin) ELISA Kit  拉丁屬名: Naxibacter

乳酸乳球菌乳亞種OPGL (Osteoprotegerin Ligand) ELISA Kit拉丁屬名: Lactococcus  lactis subsp.lactis

棘孢曲霉ACH (Acetylcholine) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus  aculeatus

絳紅鏈霉菌OVA SIgM (Ovalbumin Specific IgM) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces purpureus

表皮葡萄球菌OVA sIgE (Ovalbumin specific Immunoglobulin E) ELISA Kit拉丁屬名: Staphylococcus  epidermidis

色鹽桿菌CA125 (Carbohydrate Antigen 125) ELISA Kit拉丁屬名: Chromohalobacter  pacificum

球形賴氨酸芽孢桿菌Tryptophan Hydroxylase 1(TPH1) ELISA Kit拉丁屬名: Lysinibacillus sphaericus

粗糙脈孢菌OLAb (Oxidized Lowdensity Lipoprotein Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Neurospora crassa
反芻獸考德里氏體探針法熒光定量PCR試劑盒供應商CD200/MOX1  膜糖蛋白CD200抗體巨豆三烯酮4-(But-2-en-1-ylidene)-3,5,5-trimethylcyclohex-2-enone中藥標準品  分 子 式: C13H18O 分 子 量: 190.28142

CD66c/CEACAM6  癌胚抗原相關細胞粘附分子抗體異石當歸素Isosaxalin對照藥材 分 子 式:  分 子 量:

CPA1/Carboxypeptidase A  胰羧肽酶A1抗體五水合硫酸司巴丁(-)-Sparteine sulfate pentahydrate中藥標準品  分 子 式: C15H26N2.H2O4S 分 子 量: 332.45882

CPA2/Carboxypeptidase A2  羧肽酶A2抗體STM溶液(2M,pH7.4)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

CPB1/Carboxypeptidase B1  胰羧肽酶B1抗體4'-O-甲基葛根素4'-O-Methylpuerarin中藥標準品  分 子 式: C22H22O9 分 子 量: 430.40468

CPEB1  細胞質多聚腺苷酸結合蛋白1抗體(-)-荷包牡丹堿甲氯化物1,3-Dioxolo[4,5-g]isoquinolinium,5-[(6S)-6,8-dihydro-8-oxofuro[3,4-e]-1,3-benzodioxol-6-yl]-5,6,7,8-tetrahydro-6,6-dimethyl-,chloride (1:1), (5R)-化學標準品 分 子 式: C21H20NO6+.Cl- 分 子 量: 417.8396

Cystatin E/M  半胱氨酸蛋白酶抑制劑6抗體11-羰基-Β-乙酰乳香酸Acetyl-11-keto-beta-boswellic acid中藥標準品  分 子 式: C32H48O5 分 子 量: 512.72052

 


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