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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3418
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-12
- 更新日期： 2025-01-22
| 產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3418 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
頭孢霉屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格 | Cephalosporium spp. | LZR3418 |
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
金黃殼囊孢S100A11 (S100 Calcium Binding Protein A11) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
海角副球菌S100A7 (S100 Calcium Binding Protein A7) ELISA Kit 拉丁屬名: Paracoccus homiensis
擬莖點霉S100B (S100 Calcium Binding Protein B) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
平田頭菇S100A6 (S100 Calcium Binding Protein A6) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
廣島鏈霉菌S100A12 (S100 Calcium Binding Protein A12) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces hiroshimensis
硬桿菌SDH (Sorbitol Dehydrogenase) ELISA Kit拉丁屬名: Arthrobacter scleromae
果生鏈核盤菌sPLA2 (Screted Phospholipase A2) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
異常漢遜酵母變種SCT (Secretin) ELISA Kit 拉丁屬名: Hansenula anomala var. anomala (Hansen) H. et P.
芬娜冬菇sIgA (Secretory Immunoglobulin A) ELISA Kit拉丁屬名: Flammulina fennae
枯草芽胞桿菌枯草亞種SEPP1 (Selenoprotein P) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus subtilis subsp. subtilis
特異青霉（產(chǎn)黃青霉）SEMA7A (Semaphorin 7A) ELISA Kit 拉丁屬名: Penicillium notatum Westling
血痕韌革菌STK (serine/threonine protein kinase) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
鹽古桿菌SAA (Serum amyloid A) ELISA Kit拉丁屬名: Natrinema sp.
高盧蜜環(huán)菌SESN1 (Sestrin 1) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
球孢白僵菌SESN2 (Sestrin 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Beauveria bassiana
頭孢霉屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格eIF4EBP1/4EBP1 eIF4E結合蛋白抗體大麻烯Canniprene對照藥材 分 子 式: C21H26O4 分 子 量: 342.42874
phospho-eIF4EBP1/4EBP1(Ser64) 磷酸化4E結合蛋白1抗體商陸皂苷辛esculentoside H中藥標準品 分 子 式: 分 子 量:
phospho-eIF4EBP1(Thr37/46) 磷酸化4E結合蛋白1抗體乙酸鈉溶液(3mol/L,pH4.8,RNase free)標準滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
phospho-eIF4EBP1/4EBP1(Ser65/Thr70) 磷酸化eIF4E結合蛋白抗體對羥基苯甲醛4-Hydroxybenzaldehyde中藥標準品 分 子 式: C7H6O2 分 子 量: 122.12134
phospho-EIF4EBP1(Ser100) 磷酸化eIF4E結合蛋白抗體美格魯特N-BUTYLDEOXYNOJIRIMYCIN中藥標準品 分 子 式: C10H21NO4 分 子 量: 219.27804
phospho-EIF4EBP1(Ser111) 磷酸化eIF4E結合蛋白抗體巖大戟內(nèi)酯Ejolkinolide E化學標準品 分 子 式: C20H28O2 分 子 量: 300.435
EIF5 真核翻譯起始因子5抗體美商陸酸Olean-12-ene-28,29-dioicacid, 3,23-dihydroxy-, 29-methyl ester, (3b,4a,20b)-中藥標準品 分 子 式: C31H48O6 分 子 量: 516.70922
