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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3474
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-12
- 更新日期： 2025-01-22
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3474 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
白喉棒桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格 | Corynebacterium diphtheriae | LZR3474 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
產(chǎn)馬乳酒乳桿菌高加索酸奶粒亞種LHRH (Luteinizing Hormone-Releasing Hormone) ELISA Kit 拉丁屬名: Lactobacillus kefiranofaciens subsp. kefirgranum
白孢鏈霉菌逝霉素變種LFA-3 (Lymphocyte Function Associated Antigen 3) ELISA Kit 用途: 分類 研究
半裸鐮孢菌Lptn/XCL1 (Lymphotactin) ELISA Kit拉丁屬名: Fusarium incarnatum
細(xì)黃鏈霉菌乳糖變種M-CSF (Macrophage Colony-Stimulating Factor) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces microflavus var. lactosus
大腸埃希氏菌MIP-1α (Macrophage Inflammatory Protein 1 Alpha) ELISA Kit 拉丁屬名: Escherichia coli
枯草芽孢桿菌枯草亞種MIP-1β (Macrophage Inflammatory Protein 1 Beta) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus subtilis subsp. subtilis
近平滑假絲酵母PYGL (Glycogen Phosphorylase, Liver) ELISA Kit 拉丁屬名: Candida parapsilosis
粉紅擲孢酵母MIP-3α (Macrophage Inflammatory Protein 3 Alpha) ELISA Kit拉丁屬名: Sporobolomyces roseus
根瘤菌MIP-3β( Macrophage Inflammatory Protein 3β) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
藤黃微球菌MIP-5 (Macrophage Inflammatory Protein 5) ELISA Kit拉丁屬名: Micrococcus luteus
秦氏蜜環(huán)菌MIF (Macrophage Migration Inhibitory Factor) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
*灰葡萄孢菌MDC/CCL22 (Macrophage-Derived Chemokine) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
杰氏假單胞菌MHCⅠ/AgBⅠ/H-1Ⅰ(Major Histocompatibility ComplexⅠ) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas jessenii
霍亂弧菌MHCⅡ/AgBⅡ/H-1Ⅱ(Major Histocompatibility ComplexⅡ) ELISA Kit 拉丁屬名: Vibrio cholerae
須殼孢MHCⅢ/AgBⅢ/H-1Ⅲ(Major Histocompatibility ComplexⅢ) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
白喉棒桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格CPI17 alpha 蛋白磷酸激酶PKC/CPI-17抗體亞麻酸甲酯Methyl Linolenate化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C19H32O2 分 子 量: 292.48
phospho-CPI17 alpha (Thr38) 磷酸化蛋白磷酸激酶PKC/CPI-17抗體Triton-SDS細(xì)胞裂解液標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
ADRA2 ADRA2腎上腺素能受體2抗體大黃酚-8-O-葡萄糖苷Chrysophanol 8-O-beta-D-glucoside中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C21H20O9 分 子 量: 416.3781
ADRB1 腎上腺素能受體β1抗體山梔苷甲酯Cyclopenta[c]pyran-4-carboxylicacid, 1-(b-D-glucopyranosyloxy)-1,4a,5,6,7,7a-hexahydro-5,7-dihydroxy-7-methyl-,methyl ester, (1S,4aS,5R,7S,7aS)-中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C17H26O11 分 子 量:
APE/Girdin 肌動蛋白結(jié)合蛋白Girdin抗體芥子醛配糖物2-Propenal, 3-[4-(b-D-glucopyranosyloxy)-3,5-dimethoxyphenyl]-,(2E)-對照藥材 分 子 式: C17H22O9 分 子 量:
Drebrin 腦發(fā)育調(diào)節(jié)蛋白抗體愈創(chuàng)木酚2-Methoxyphenol中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C7H8O2 分 子 量: 124.13722
DAG1 肌萎縮相關(guān)蛋白DAG1抗體蛇莓甙A[1]Benzopyrano[5,4,3-cde][1]benzopyran-5,10-dione,2,8-dihydroxy-3-methoxy-7-(b-D-xylopyranosyloxy)-對照藥材 分 子 式: C20H16O12 分 子 量:
