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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR3478
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-12
- 更新日期： 2025-01-22
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR3478 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
棒桿菌通用探針?lè)晒舛縋CR試劑盒規(guī)格 | Corynebacterium spp. | LZR3478 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
泡盛曲霉NGAL (Neutrophil Gelatinase Associated Lipocalin) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus awamori
惡臭假單胞菌NOX1 (Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate Oxidase 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudomonas putida
條紋白蟻傘NOX4 (Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate Oxidase 4) ELISA Kit用途: 食用菌
傘枝犁頭霉NADPH (Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate) ELISA Kit拉丁屬名: Absidia corymbifera
米曲霉N-ACHR (Nicotinic Acetylcholine Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus oryzae
炭黑曲霉NT-proBNP (N-Terminal Pro-Brain Natriuretic Peptide) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus carbonarius
Actinomadura cellulosilyticaPIIINP (N-Terminal Procollagen III Propeptide) ELISA Kit拉丁屬名: Actinomadura cellulosilytica sp/ nov/
大腸埃希氏菌NFIL3 (Nuclear Factor, Interleukin 3 Regulated) ELISA Kit 拉丁屬名: Escherichia coli
河生腸桿菌NF-κB (Nuclear Factor Kappa B)ELISA Kit拉丁屬名: Enterobacter amnigenus
網(wǎng)孢正青霉NF-κB p65(Nuclear Factor-κB P65) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium reticulisporum
白假絲酵母NRIP1 (Nuclear Receptor Interacting Protein 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Candida albicans
冷溫木拉克酵母NXF1 (Nuclear RNA Export Factor 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Mrakia frigida
卡莫納枝芽孢桿菌NUP107 (Nucleoporin 107kDa) ELISA Kit 拉丁屬名: Virgibacillus carmonensis
黑曲霉NUP153 (Nucleoporin 153kDa) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus niger
地霉NUP155 (Nucleoporin 155kDa) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
棒桿菌通用探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒規(guī)格GAS8 生長(zhǎng)停滯特異性蛋白8抗體DL-2-氨基丁酸DL-2-Aminobutyric acid化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C4H9NO2 分 子 量: 103.11976
GTPBP4/CRFG GTP結(jié)合蛋白4抗體（慢性蛋白）老鸛草素Geraniin中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C41H28O27 分 子 量: 952.64482
HACE1 E3泛素蛋白連接酶HACE1抗體甲基麥冬高黃酮A4H-1-Benzopyran-4-one, 3-(1,3-benzodioxol-5-ylmethyl)-5,7-dihydroxy-6,8-dimethyl-中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C19H16O6 分 子 量: 340.32674
SMARCA6/HELLS 淋巴特異性解旋酶抗體白頭翁皂苷DLup-20(29)-en-28-oic acid,
3-[(O-6-deoxy-a-L-mannopyranosyl-(1?2)-O-[b-D-glucopyranosyl-(1?4
)]-a-L-arabinopyranosyl)oxy]-23-hydroxy-, (3b,4a)-中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C47H76O17 分 子 量: 913.09614
SMARCA1/SNF2L 解旋酶SNF2L抗體長(zhǎng)春堿衍生物[8,15'-Biaspidospermidine]-3,3'-dicarboxylicacid,2,2',3,3'-tetradehydro-6',7':7,16'-diepoxy-6,15-dihydroxy-16,17-dimethoxy-,dimethyl ester, (*,6b,7a,8a,12R,19a)-(5'a,6'b,7'b,12'R,19'a)-對(duì)照藥材 分 子 式: C44H50N4O10 分 子 量:
ACBD6 酰基輔酶A結(jié)合結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體CroverinCroverin化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C21H22O6 分 子 量: 370
ACVR1B/ALK4 激活素A受體1B抗體對(duì)葉百部堿三氟乙酸鹽中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: 分 子 量:
