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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3514
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-13
- 更新日期： 2025-01-22
| 產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3514 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
牛肺線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格 | Dictyocaulus viviparus | LZR3514 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
慢生根瘤菌GRIA1(Glutamate receptor 1) ELISA Kit用途: 與胡枝子共生固氮
食酸戴爾福特菌*拉丁屬名: Delftia acidovorans
多殺性巴氏桿菌IL-8 (Interleukin 8) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
褐球固氮菌IL-1β (Interleukin 1 Beta) ELISA Kit 拉丁屬名: Azotobacter chroococcum
節(jié)桿菌屬IFN-γ (Interferon Gamma) ELISA Kit拉丁屬名: Arthrobacter sp.
滕倉赤霉IgG (Immunoglobulin G) ELISA Kit拉丁屬名: Gibberella fujikuroi
大腸埃希菌IL-10 (Interleukin-10) ELISA Kit拉丁屬名: coli
山綠豆根瘤菌IL-12 p40 (Interleukin 12 p40) ELISA Kit用途: 固氮。
*正紅菇IL-18 (Interleukin 18) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
拜耳接合酵母IL-23 p40 (Interleukin 23 p40) ELISA Kit拉丁屬名: Zygosaccharomyces bailii
釀酒酵母TGF-β1 (Transforming Growth Factor β1) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
傘枝犁頭霉TNF-α (Tumor Necrosis Factor Alpha) ELISA Kit拉丁屬名: Absidia corymbifera
枯草芽孢桿菌*INS (Insulin) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
長柄鏈格孢ALB (Albumin) ELISA Kit用途: 植物病原物，用于該菌種群遺傳學(xué)研究
鮮綠青霉HP (Haptoglobin) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium viridicatum
牛肺線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格HLC3/Kanadaptin 癌基因蛋白3抗體枸櫞酸鈉抗凝劑(4%,無菌)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
OVCA2 相關(guān)基因2蛋白抗體脫水長春堿3',4'-Anhydrovinblastine中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C46H56N4O8 分 子 量: 792.95884
PRUNE/DRES17 相關(guān)蛋白DRES17抗體白頭翁皂苷BPulchinenoside B中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: 分 子 量:
TEM7R/Plxdc2 內(nèi)皮標(biāo)記相關(guān)蛋白質(zhì)7抗體柳杉二醇Cryptomeridiol對照藥材 分 子 式: C15H28O2 分 子 量: 240.38162
phospho-LSP1 (Ser252) 磷酸化白細胞F肌動蛋白結(jié)合蛋白抗體β-莎草醇β-Rotunol對照藥材 分 子 式: C15H22O2 分 子 量: 234.34139
MAP3K2/MEKK2 絲裂原活化蛋白激酶激酶2抗體梓醇6-咖啡酸酯Verminoside化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C23H28O12 分 子 量: 496.46122
IFNA4/IFNA76/IFNA M1 干擾素α4抗體大蒜素Allicin化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C6H10Os2 分 子 量: 162.26
