- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào):LZR3534
- 價(jià)格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-13
- 更新日期: 2025-01-22
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號(hào) | LZR3534 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
艾利希體屬通用探針?lè)晒舛縋CR試劑盒規(guī)格 | Ehrlichiae spp. | LZR3534 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
粗皮馬勃SERT (Serotonin Transporter ) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
釀酒酵母GLUT2 (Glucose Transporter 2) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
紫紅曲霉RAPGEF1 (Rap Guanine Nucleotide Exchange Factor 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Monascus purpureus
蘇云金芽胞桿菌IκBβ (Inhibitory Subunit of NF Kappa B Beta) ELISA Kit 用途: 用于抗蟲(chóng)基因的分離和抗蟲(chóng)相關(guān)基礎(chǔ)研究。
金龜子假絲酵母MAP-2 (Microtubule Associated Protein 2) ELISA Kit拉丁屬名: Candida oxycetoniae
水冷源橙色單胞菌6-K-PG (6-Keto-prostaglandin) ELISA Kit拉丁屬名: Aurantimonas frigidaquae
阿木氏鏈霉菌EPP (Erythrocyte Protoporphyrin) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces almquistii
香菇NT-4 (Neurotrophin 4) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
釀酒酵母NUP205 (Nucleoporin 205kDa) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
全食副球菌TNFRSF1A (Tumor Necrosis Factor Receptor Superfamily, Member 1A) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
類產(chǎn)堿假單胞菌CNTN2 (Contactin 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudomonas pseudoalcaligenes
啤酒酵母ALD (Aldolase) ELISA Kit用途: 實(shí)驗(yàn)研究
蕈青霉IGF1R (Insulin Like Growth Factor 1 Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium paxilli
草菇AQP-2 (Aquaporin 2) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
PelagibacteriumACP1 (Acid Phosphatase 1) ELISA Kit拉丁屬名: Pelagibacterium halotolerans
艾利希體屬通用探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒規(guī)格NF-ATc4 T細(xì)胞激活核轉(zhuǎn)錄因子4抗體洋川芎內(nèi)酯HSenkyunolide H中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C12H16O4 分 子 量: 224.25304
Unc18-3 突觸囊泡融合蛋白Unc18-3抗體蝙蝠葛氰苷(2Z)-2-[(4S,6R)-4-hydroxy-6-[(2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-1-cyclohex-2-enylidene]acetonitrile中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C14H19NO7 分 子 量: 313.30316
caspase-8 subunit p18 半胱氨酸蛋白酶8抗體胰蛋白酶溶液(1%)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
IRAK1 白介素-1受體相關(guān)激酶1抗體羽扇豆鹼7,14-Methano-2H,11H-dipyrido[1,2-a:1',2'-e][1,5]diazocin-11-one,dodecahydro-, (7S,7aR,14S,14aS)-對(duì)照藥材 分 子 式: C15H24N2O 分 子 量: 248.36386
phospho-APE(Ser1417) 磷酸化肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白Girdin抗體茜素-1-甲醚9,10-Anthracenedione,2-hydroxy-1-methoxy-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C15H10O4 分 子 量: 254.2375
PRDM1/Blimp1 B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)成熟蛋白1抗體6-羥基山奈酚 3-蕓香糖-6-葡萄糖苷6-Hydroxykaempferol 3-Rutinoside -6-glucoside化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: 分 子 量:
Dlx1 同源轉(zhuǎn)錄因子DLX1抗體Spinner鹽粉劑(1×,無(wú)酚紅)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量: