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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
腦胞內原蟲屬通用·探針法熒光定量PCR試劑盒說明書
  • 品牌:聯祖
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:LZR3539
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-13
  • 更新日期: 2025-01-22
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 聯祖
貨號 LZR3539
用途 公司產品僅用于科研
包裝規格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環步驟

溫度

時間

循環數

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

 

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。

產品名稱

英文名稱

貨號

腦胞內原蟲屬通用·探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

Encephalitozoon spp.

LZR3539


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

以下列是公司正在熱銷的產品:

多主棒孢菌sgp130 (soluble Glucoprotein 130) ELISA Kit拉丁屬名: Corynespora cassiicola

毛霉屬OSM (Oncostatin M) ELISA Kit 拉丁屬名: Mucor  sp.

乙酸鈣不動桿菌LUM (Lumican) ELISA Kit拉丁屬名: Acinetobacter calcoaceticus

點柄粘蓋牛肝MCRS1 (Microspherule Protein 1) ELISA Kit拉丁屬名: Suillus granulatus

弗雷德里克斯堡假單胞菌UPP2 (Uridine Phosphorylase 2) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas frederiksbergensis

釀酒酵母SEMA3B (Semaphorin 3B) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae

Paraburkholderia sp.FE (Ferritin) ELISA Kit拉丁屬名: Paraburkholderia sp.

短小芽孢桿菌snRNP/Sm (Small Nuclear Ribonucleoprotein) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus pumilus

紫麥角菌CNX (Calnexin) ELISA Kit拉丁屬名: Claviceps purpurea

艾登短芽孢桿菌ARRβ1 (Arrestin Beta 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Brevibacillus aydinogluensis

節桿菌GAL4 (Galectin 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Arthrobacter  alpinus

雷州灣芽孢桿菌AVPR1A (Arginine Vasopressin Receptor 1A) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus  neizhouensis

亮白曲霉Bid (BH3 Interacting Domain Death Agonist) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus  candidus

鞘氨單胞菌屬C3c (Complement Fragment 3c) ELISA Kit拉丁屬名: Sphingomonas hylomecon sp. Nov

變異居白蟻菌TI-Ag (Thymus Independent Antigen) ELISA Kit拉丁屬名: Isoptericola variabilis
腦胞內原蟲屬通用·探針法熒光定量PCR試劑盒說明書CA8  碳酸酐酶相關蛋白8抗體FAB固定液標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

CACNB1  鈣通道電壓依賴性β1蛋白抗體1,4,5,6-四羥基-7-苯基氧蒽酮1,4,5,6-Tetrahydroxy-7-(3-methylbut-2-en-1-yl)-9H-xanthen-9-one對照藥材 分 子 式: C18H16O6 分 子 量: 328.31604

CDK5RAP3  周期素依賴性激酶5激活結合蛋白C53抗體草酸Oxalic acid中藥標準品  分 子 式: C2H2O4 分 子 量: 90.03

CENPH  著絲粒蛋白H抗體12-乙酰氧基松香酸12-Acetoxyabietic acid對照藥材 分 子 式:  分 子 量:

CKAP4  細胞骨架相關蛋白4抗體4-表可木酸1-Naphthalenecarboxylic acid,

decahydro-1,4a-dimethyl-6-methylene-5-[(2E)-3-methyl-2,4-pentadienyl

]-, (1R,4aR,5S,8aR)-對照藥材 分 子 式: C20H30O2 分 子 量:

CRISP3  富含半胱氨酸分泌蛋白3抗體等效-16beta,17-二羥基-19-異貝殼杉烷酸Kauran-18-oic acid,16,17-dihydroxy-, (4a)-對照藥材 分 子 式: C20H32O4 分 子 量: 336.46568

CKMT/Creatine kinase MT  酸性型線粒體肌酸激酶抗體油酸甲酯Methyl oleate中藥標準品  分 子 式: C19H36O2 分 子 量: 296.49

 


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