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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3547
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-13
- 更新日期： 2025-01-22
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3547 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
阪崎腸桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書 | Enterobacter sakazaki | LZR3547 |
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
長枝木霉 PSAP (Prosaposin) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
枯草芽孢桿菌CD23/FcεRII (Receptor II for the Fc Region of Immunoglobulin E) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
毛栓孔菌PAIg (Platelet Associated Immunoglobulins) ELISA Kit拉丁屬名: Trametes hirsuta
藍(lán)微褐鏈霉菌RAG-2 (Recombination Activating Gene 2) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces cyaneofuscatus
紫紅鏈霉菌Ext-N (N-Terminal Extein) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces violaceoruber
節(jié)桿菌cTn-I/TNNI3 (cardiac Troponin I) ELISA Kit 拉丁屬名: Arthrobacter livingstonensis
猴頭菌FLNα (Filamin A, Alpha) ELISA Kit用途: 食藥用菌
尖頂鹽單胞菌NT (Neurotensin) ELISA Kit拉丁屬名: Halomonas arcis
嗜果黑星菌GATA3 (GATA Binding Protein 3) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
糞腸球菌PLB (Phospholipase B) ELISA Kit拉丁屬名: Enterococcus faecalis
努比鹵地?zé)o氧芽孢桿菌GHAb (Anti-Growth Hormone Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Anoxybacillus rupiensis
草酸青霉GATA1 (GATA Binding Protein 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Penicillium oxalicum
卡伍爾鏈霉菌HPR (Haptoglobin Related Protein) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces cavourensis Skarbek and Brady
擬胞囊菌OXB (Orexin B) ELISA Kit拉丁屬名: Kibdelosporangium sp.
多主葡萄殼菌CTACK (Cutaneous T-cell Attracting Chemokine) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
阪崎腸桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書RRBP1 核糖體結(jié)合蛋白1抗體強(qiáng)力霉素doxycycline中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C22H24N2O8 分 子 量: 444.44
S100A7/Psoriasin S100鈣結(jié)合蛋白A7抗體枸櫞酸鈉抗凝劑(3.2%,無菌)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
RBBP6 視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤結(jié)合蛋白6抗體大果桉醛 NMacrocarpal N對照藥材 分 子 式: 分 子 量:
S100PBP/S100P binding protein S100P結(jié)合蛋白抗體四乙酸堪非醇酯2-(4-Acetoxyphenyl)-4-oxo-4H-chromene-3,5,7-triyl triacetate對照藥材 分 子 式: C23H18O10 分 子 量: 454.38302
SAMD14 SAMD14抗體單葡萄糖醛酸甘草次酸b-D-Glucopyranosiduronic acid, (3b,20b)-20-carboxy-11-oxo-30-norolean-12-en-3-yl化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C36H54O10 分 子 量: 646.80796
CDMP1/GDF5 軟骨衍生形態(tài)發(fā)生蛋白1抗體沒食子酸辛酯Octyl gallate中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C15H22O5 分 子 量: 282.33218
RNA polymerase II CTD repeat YSPTSPS (phospho S2) 磷酸化RNA聚合酶II CTD抗體重樓皂苷E化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C51H82O20 分 子 量: 1015.18478
