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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
鴨毒探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號:LZR3518
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-13
  • 更新日期: 2025-01-22
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號 LZR3518
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號
是否進(jìn)口

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

鴨毒探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格

Duck Enteritis Virus

LZR3518

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

大腸埃希氏桿菌GAL1 (Galectin 1 ) ELISA Kit 拉丁屬名: Escherichia coli

解淀粉芽孢桿菌COL6 (Collagen Type VI) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus amyloliquefaciens

根癌土壤桿菌CTLA4 (Cytotoxic T Lymphocyte Associated Antigen 4) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

擬枝孢鐮孢NP (Nandrolone Phenylpropionate) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

葡萄汁有孢漢遜酵母Bcl-2 (B-cell Leukemia/Lymphoma 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Hanseniaspora  uvarum

復(fù)輪生小克銀漢霉F13 (Coagulation Factor ⅩⅢ) ELISA Kit拉丁屬名: Cunninghamella multiverticillata

廣島鏈霉菌CTAPIII (Connective Tissue Activating Peptide III) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces hiroshimensis

釀酒酵母GH (Growth Hormone) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

尖孢鐮孢PP13 (Placental Protein13) ELISA Kit拉丁屬名: Fusarium oxysporum

平菇ApoB100 (Apolipoprotein B100) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

密歇根棍狀桿菌標(biāo)記亞種CRT (Calreticulin) ELISA Kit 拉丁屬名: Clavibacter michiganensis subsp. tessellarius

戊糖片球菌PRI (Placental Ribonuclease Inhibitor) ELISA Kit拉丁屬名: Pediococcus  pentosaceus

Priceomyces sp.Methylase ELISA Kit拉丁屬名: Priceomyces sp.

阿姆斯特丹曲霉NAGLU (N-Acetyl Alpha-D-Glucosaminidase) ELISA Kit 拉丁屬名: Eurotium amsodami

枯草芽孢桿菌枯草亞種IL-19 (Interleukin 19) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis subsp. subtilis
鴨毒探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格GLUT10/Glucose Transporter GLUT10  葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白10抗體檉柳黃素4H-1-Benzopyran-4-one,3,5,7-trihydroxy-2-(3-hydroxy-4-methoxyphenyl)-對照藥材 分 子 式: C16H12O7 分 子 量: 316.26228

CD54/ICAM-1  細(xì)胞間粘附分子1抗體絹毛欖仁苷Olean-12-en-28-oicacid, 2,3,19,23-tetrahydroxy-, b-D-glucopyranosyl ester, (2a,3b,4b,19a)-中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C36H58O11 分 子 量: 666.83912

Filaggrin  兜甲蛋白抗體SSC緩沖液(20×,pH7.0,RNase free)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

Sortilin/NTR3/Gp95  神經(jīng)降壓素受體3抗體(糖蛋白95)1,2-O-Dilinoleoyl-3-O-β-D-galactopyranosylracglycerol1,2-O-Dilinoleoyl-3-O-beta-D-galactopyranosylracglycerol中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式:  分 子 量:

IFNA16/Interferon alpha 16  干擾素α16抗體20-去氧巨大戟萜醇20-deoxyingenol中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C20H28O4 分 子 量: 332.43392

NET1  去甲腎上腺素轉(zhuǎn)運蛋白/神經(jīng)遞質(zhì)去甲腎上腺素轉(zhuǎn)運體抗體臺氏液(Tyrode's Solution,無鈣)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

ABCA2  三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運蛋白2抗體N1,N10-雙(對香豆酰)亞精胺2-Propenamide,3-(4-hydroxyphenyl)-N-[3-[[4-[[3-(4-hydroxyphenyl)-1-oxo-2-propenyl]amino]butyl]amino]propyl]-,(E,E)- (9CI)對照藥材 分 子 式: C25H31N3O4 分 子 量:

 


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