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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR3532
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-13
- 更新日期： 2025-01-22
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR3532 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
里氏埃里希氏體探針?lè)晒舛縋CR試劑盒供應(yīng)商 | Ehrlichia risticii | LZR3532 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
放射形根瘤菌α-GST (α-glutathione S-transferases) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizobium radiobacter
細(xì)黃鏈霉菌CAPA (Cytotoxin Associated Protein A) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces microflavus
微小桿菌屬ANG II R1-Ab (Angiotensin II Receptor 1 Antibody) ELISA Kit 拉丁屬名: Exiguobacterium sp.
Pseudofusicoccum stromaticumGAS (N-Acetylgalactosamine 6-Sulfatase) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
米色擲孢酵母PYY (Peptide YY) ELISA Kit拉丁屬名: Sporobolomyces oryzicola
釀酒酵母TAF13 (TATA Box Binding Protein Associated Factor 13) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
瑟氏泰勒蟲（兩當(dāng)株）ASK-1 (Apoptosis Signal Regulating Kinase 1) ELISA Kit拉丁屬名: sergenti
淡紫灰鏈霉菌產(chǎn)褐色變種MIA1 (Melanoma Inhibitory Activity Protein 1) ELISA Kit用途: 分類 研究
藤倉(cāng)鐮孢Neopterin ELISA Kit拉丁屬名: Fusarium fujikuroi
FlavihumibacterSEMA3A (Semaphorin 3A) ELISA Kit拉丁屬名: Flavihumibacter petaseus
枯草芽孢桿菌VDR (Vitamin D Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
金針菇SPD (Pulmonary Surfactant Associated Protein D) ELISA Kit 拉丁屬名: Collybia velutipes (Curt.: Fr.) Quél.
茶擬盤多毛孢LEPR (Leptin Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Pestalotiopsis theae
西唐氏鏈霉菌DEFα5 (Defensin Alpha 5, Paneth Cell Specific) ELISA Kit用途: 產(chǎn)生代謝產(chǎn)物具有抑菌活性
胡椒枯萎病TE (Telomerase) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
里氏埃里希氏體探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒供應(yīng)商CDH11/OB-Cadherin 鈣粘附蛋白-11抗體苦瓜素 I3β,7β,23-Trihydroxycucurbita-5,24-dien-19-al化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C30H48O4 分 子 量: 472.69972
Lin-28B RNA結(jié)合蛋白LIN28B抗體楊梅醇Tricyclo[12.3.1.12,6]nonadeca-1(18),2,4,6(19),14,16-hexaene-3,9,15-triol,16,17-dimethoxy-, (9R)-對(duì)照藥材 分 子 式: C21H26O5 分 子 量: 358.42814
HSP1/Protamine P1 精子魚精蛋白P1抗體二萜酸甲酯Clerodermic acid methyl ester對(duì)照藥材 分 子 式: C21H30O4 分 子 量: 346.4605
EGR3 早期生長(zhǎng)反應(yīng)蛋白3抗體茯苓酸Pachymic acid中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C33H52O5 分 子 量: 528.76298
SOX10 轉(zhuǎn)錄因子SOX10抗體薔薇酸,'野鴉椿酸Urs-12-en-28-oic acid,2,3,19-trihydroxy-, (2a,3a)-對(duì)照藥材 分 子 式: C30H48O5 分 子 量: 488.69912
PMCA4/Calcium Pump PMCA4 ATPase 細(xì)胞膜鈣ATP酶4抗體甘草酸單鉀鹽a-D-Glucopyranosiduronic acid, (3b,20b)-20-carboxy-11-oxo-30-norolean-12-en-3-yl 2-O-b-D-glucopyranuronosyl-, potassiumsalt (1:1), (3b)-中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C42H61O16-.K+ 分 子 量: 861.022440000001
phospho-ER-beta(ser105) 磷酸化雌激素受體β抗體乙烯硫脲Imidazolidine-2-thione化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C3H6N2S 分 子 量: 102.15814
