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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
山羊附紅細(xì)胞體探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號:LZR3568
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-13
  • 更新日期: 2025-01-22
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號 LZR3568
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號
是否進(jìn)口

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

山羊附紅細(xì)胞體探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商

Eperythrozoon lirei

LZR3568

PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

膠孢CASP14 (Caspase 14) ELISA Kit用途: 植物病原物,用于種群的遺傳學(xué)研究和炭疽病害的診斷和防治

米氏假單胞菌RXFP1 (Relaxin/Insulin Like Family Peptide Receptor 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudomonas  migulae

假單胞菌GPIIb/IIIa (Platelet Membrane Glycoprotein IIb/IIIa) ELISA Kit用途: 在無機(jī)鹽培養(yǎng)基中添加100mg/L的倍硫磷,降解率達(dá)30%左右

纖細(xì)白僵菌PIGR/SC (Polymeric Immunoglobulin Receptor/Membrane Secretory Component) ELISA Kit用途: 生防

艾比湖嗜鹽堿紅菌CTNNα1 (Catenin, Alpha 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Natronorubrum aibiense

蘇云金芽孢桿菌ECFR (Eosinophil Chemotactic Factor Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus  thuringiensis

PseudomonasMEC/CCL28 (Mucosae Associated Epithelia Chemokine) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas  kunshanensis sp/ Nov/

慶豐鏈霉菌LIFR (Leukemia Inhibitory Factor Receptor) ELISA Kit 用途: 對水稻稻瘟病有防治效果

Rummeliibacillus stabekisiiCLC (Charcot Leyden Crystal Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Rummeliibacillus stabekisii

黑木耳MAG (Myelin Associated Glycoprotein) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

枯草芽孢桿菌11-DH-TXB2 (11-Dehydro-thromboxane B2) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis

華根霉AFA (Anti-Filaggrin Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizopus chinensis

金黃色葡萄球菌*Flt3 (FMS Like Tyrosine Kinase 3) ELISA Kit拉丁屬名: Staphylococcus aureus Rosenbach

杏鮑菇PCP (Procollagen C Peptidase) ELISA Kit用途: 試驗栽培

銅綠假單胞菌(綠膿桿菌)αHBDH (α-Hydroxybutyrate Dehydrogenase) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas aeruginosa(Schroeter) Migula
山羊附紅細(xì)胞體探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商PNPLA6/NTE  含patatin樣磷脂酶6抗體氧化白藜蘆醇Oxyresveratrol中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C14H12O4 分 子 量: 244.24

OTC  鳥氨酸氨基甲酰轉(zhuǎn)移酶抗體遼東楤木皂苷XAraloside X中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C60H98O28 分 子 量: 1266

Desmoglein 1/DSG1  橋粒芯糖蛋白1氯化銨溶液(5mol/L)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

CAMKIV/CAMK4  鈣/鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激酶4抗體植酸鈣myo-Inositol,1,2,3,4,5,6-hexakis(dihydrogen phosphate), calcium salt (1:6)中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C6H6O24P6-12.6[Ca+2] 分 子 量: 888.408240000001

phospho-CAMK4(Thr196 + Thr200)  磷酸化鈣/鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激酶4抗體9,10-二甲氧基鐵屎米酮9,10-Dimethoxycanthin-6-one化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C16H12N2O3 分 子 量: 280.278

LBP1/Upstream Binding Protein 1  上游結(jié)合蛋白1抗體胡椒堿Piperine中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C17H19NO3 分 子 量: 285.34

SDF4  基質(zhì)細(xì)胞衍生因子4抗體(鈣結(jié)合蛋白)四氫黃連堿Tetrahydrocoptisine中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C19H17NO4 分 子 量: 323.34258


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