產地 | 進口、國產 |
品牌 | 聯祖 |
貨號 | LZR3578 |
用途 | 公司產品僅用于科研 |
包裝規格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
馬病毒1型探針法熒光定量PCR試劑盒規格 | Equine Herpesvirus 1 (EHV-1) | LZR3578 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環步驟 | 溫度 | 時間 | 循環數 |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產品:
暗蓋淡鵝膏菌GSTθ1/GSTt1 (Glutathione S Transferase Theta 1) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
巨大芽胞桿菌NFRκB (Nuclear Factor Related To Kappa B Binding Protein) ELISA Kit用途: 分類、研究,具有處理富營養水體和養殖廢水潛力。
耐久腸球菌VEGF (Vascular Endothelial Cell Growth Factor ) ELISA Kit 拉丁屬名: Enterococcus durans
塔賓曲霉PGA (Pepsinogen A ) ELISA Kit用途: 以廢糖蜜為原料 檸檬酸
分枝節桿菌GM-CSF Ab (Anti-Granulocyte Macrophage Colony Stimulating Factor Antibody) ELISA Kit 拉丁屬名: Arthrobacter ramosus
淺天青鏈霉菌IL-23 (Interleukin 23) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces cyaneus
SporosarcinaNGF (Nerve Growth Factor) ELISA Kit 拉丁屬名: Sporosarcina sp.
盤長孢狀刺盤孢CENPB (Centromere Protein B) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
淺白隱球酵母ER (Estradiol Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Cryptococcus albidus
豌豆根瘤菌MUC20 (Mucin 20) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizobium leguminosarum
棉阿舒囊霉GTF2A1 (General Transcription Factor IIA, Polypeptide 1) ELISA Kit拉丁屬名: Ashbya gossypii
Lactobacillus brevisEL/LIPG (Endothelial Lipase) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus brevis
檸檬色短小桿菌sAC (Soluble Adenylate Cyclase) ELISA Kit拉丁屬名: Curtobacterium citreum
游動放線菌*IL-4 (Interleukin 4) ELISA Kit拉丁屬名: Actinoplanes sp.
格氏嗜鹽堿桿菌MANF (Mesencephalic Astrocyte Derived Neurotrophic Factor) ELISA Kit拉丁屬名: Natronobacterium gregoryi
馬病毒1型探針法熒光定量PCR試劑盒規格CLPTM1L/CRR9 順氯氨鉑耐藥相關蛋白9抗體繡球酚hydrangenol中藥標準品 分 子 式: C15H12O4 分 子 量: 256.25338
Calpain 12 鈣激活蛋白酶12抗體葉黃素xanthophyll from alfalfa中藥標準品 分 子 式: C40H56O2 分 子 量: 568.88
Coronin 3 冠蛋白3抗體β-丙氨酸3-Aminopropanoic acid化學標準品 分 子 式: C3H7NO2 分 子 量: 89.09318
Aggrecan1 軟骨蛋白聚糖抗體11Beta-羥基洋椿苦素24-Norchola-1,5,20,22-tetraene-3,7-dione,14,15:21,23-diepoxy-6,11-dihydroxy-4,4,8-trimethyl-, (11b,13a,14b,15b,17a)- (9CI)對照藥材 分 子 式: C26H30O6 分 子 量:
phospho-ANAPC1 (Ser355) 磷酸化細胞周期末期促進復合蛋白APC1抗體α-香樹脂酮α-Amyrenone化學標準品 分 子 式: C30H48O 分 子 量: 424.70152
DAD1 細胞死亡防衛蛋白1抗體PLPD固定液標準滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
TCERG1/CA150 轉錄延伸調節蛋白1抗體二甲苯青FF溶液(1%)標準滴定溶液 分 子 式: 分 子 量: