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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR3597
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-13
- 更新日期： 2025-01-22
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR3597 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
肝片吸蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 | Fasciola hepatica | LZR3597 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
交鏈孢菌CXCL16 (Chemokine C-X-C-Motif Ligand 16) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
白金針21DSP (Desmoplakin) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
漏斗狀側(cè)耳（鳳尾菇）HCCS (Holocytochrome C Synthase) ELISA Kit 拉丁屬名: Pleurotus sajor-caju
假單胞菌GNLY (Granulysin) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas baetica
洋蔥伯克霍爾德氏菌ApoA2 (Apolipoprotein A2) ELISA Kit拉丁屬名: Burkholderia cepacia
不等彎孢TA (Anti-Teichoic Acid Antibody) ELISA Kit用途: 研究
根瘤菌GasR (Gastrin Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizobium herbae
薔薇放線孢*PRSS1 (Protease, Serine, 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Diplocarpon rosae
頂孢頭孢霉REG1α (Regenerating Islet Derived Protein 1 Alpha) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
香菇GPC4 (Glypican 4) ELISA Kit 用途: 應(yīng)用
齊藤假絲酵母CRHBP (Corticotropin Releasing Hormone Bingding Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Candida saitoana
巨大芽胞桿菌REG3γ (Regenerating Islet Derived Protein 3 Gamma) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus megaterium
木賊鐮孢TNX (Tenascin X) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
克雷伯氏菌屬PGR (Progesterone Receptor) ELISA Kit 拉丁屬名: Klebsiella sp.
大腸菌群質(zhì)控樣品CCL16 (Chemokine C-C-Motif Ligand 16) ELISA Kit規(guī)格: 西林瓶凍干粉
肝片吸蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 CCDC125 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白125抗體4-甲基傘形酮（羥甲香豆素）7-Hydroxy-4-methylcoumarin植物激素及核酸類 分 子 式: C10H8O3 分 子 量: 176.17
CCDC37 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白37抗體山柰酚-3-槐二糖-7-鼠李糖苷Kaempferol 3-sophoroside-7-rhamnoside化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: 分 子 量:
CCDC17 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白17抗體赤芝酸Dlucidenic acid D中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C29H38O8 分 子 量: 514.60722
DCTN1/Dynactin 1 動(dòng)力蛋白激活蛋白1抗體三萜酸 AMicranoic acid A對(duì)照藥材 分 子 式: C22H32O3 分 子 量: 344.48768
SNF1LK2/SIK2 絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶SIK2抗體苦蘇花皂苷CLup-20(29)-en-28-oic acid,
3-[[2-O-(6-deoxy-a-L-mannopyranosyl)-a-L-arabinopyranosyl]oxy]-,
O-6-deoxy-a-L-mannopyranosyl-(1?4)-O-b-D-glucopyranosyl-(1?6)-b-
D-glucopyranosyl ester, (3b)-中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C59H96O25 分 子 量:
SHARP1/DEC2 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子DEC2抗體異去氫鉤藤堿Isocorynoxeine中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C22H26N2O4 分 子 量: 382.45284
MICB MHC I類鏈相關(guān)蛋白B乙酸鈉緩沖液(0.1mol/L,pH3.6-5.6)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
