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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3605
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-13
- 更新日期： 2025-01-22
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3605 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
貓病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 | Feline Immunodeficiency Virus （FIV） | LZR3605 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
吉氏根瘤菌HMGCS1 (3-Hydroxy-3-Methylglutaryl-Coenzyme A Synthase 1) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizobium giardinii
微球菌屬NEB (Noradrenaline Bitartas) ELISA Kit拉丁屬名: Micrococcus sp.
小托柄鵝膏菌PF4V1 (Platelet Factor 4 Variant 1) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
阿魏側(cè)耳FGγ (Fibrinogen Gamma) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
大腸桿菌BMPR1A (Bone Morphogenetic Protein Receptor, type IA) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia coli
巴斯德酵母AKA (Anti-Keratin Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces pastorianus
彎曲高溫單孢菌LRG1 (Leucine Rich Alpha-2-Glycoprotein 1) ELISA Kit用途: Degrades cellulose
桑莖點(diǎn)霉IAPP (Islet Amyloid Polypeptide) ELISA Kit用途: 植物病原物，為該病防治提供依據(jù)
南方異擔(dān)子菌TIMP-3 (Tissue Inhibitors of Metalloproteinase 3) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
煙曲霉CTAGE (Cutaneous T-Cell Lymphocyte Associated Antigen) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus fumigatus Fresen
灰平鏈霉菌PGM (Phosphoglucomutase) ELISA Kit用途: 分類
枯斑擬盤多毛孢ANG-R-Tie1 (Angiopoietin Receptor Tie1) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
食氮嗜異生質(zhì)菌RETN (Resistin) ELISA Kit 拉丁屬名: Xenophilus azovorans
漢遜德巴利酵母ANG I R-Ab (Angiotensin I Receptor Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Debaryomyces hansenii
阪崎腸桿菌PKCδ1 (Protein Kinase C Delta ) ELISA Kit 拉丁屬名: Enterobacter sakazakii
貓病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 AXL/UFO 粘附相關(guān)激酶抗體柚皮苷7-(2-O-(6-deoxy-alpha-L-mannopyranosyl)-beta-D-glucopyranosyloxy)-2,3-dihydro-4',5,7-trihydroxyflavone中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C27H32O14 分 子 量: 580.54
Delta Catenin δ連環(huán)蛋白/δ連環(huán)素/δ鏈接素抗體（δ-catenin）海柯皂苷元(25R)-3b-Hydroxy-*-spirostan-12-one脂肪酸類 分 子 式: C27H42O4 分 子 量: 430.61998
OCIAD1 免疫反應(yīng)抗原抗體鵝掌揪內(nèi)酯Oxireno[9,10]cyclodeca[1,2-b]furan-9(1aH)-one,7-(acetyloxy)-2,3,6,7,7a,8,10a,10b-octahydro- 1a,5-dimethyl-8-methylene-,[1aR-(1aR*,4E,- 7R*,7aR*,10aS*,10bS*)]- 對照藥材 分 子 式: C17H22O5 分 子 量: 306.35358
PAGE4/GAGE9 相關(guān)蛋白4抗體橙皮內(nèi)酯Meranzin中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C15H18O5 分 子 量: 278.30042
PMPCB 線粒體導(dǎo)肽水解酶β抗體Gey's紅細(xì)胞裂解液(Gey's Lysis Buffer)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
PRAME 優(yōu)先表達(dá)抗原抗體多聚甲醛溶液(8% PFA)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
Plastin L 淋巴細(xì)胞胞漿蛋白LCP1抗體丹皮酚新苷Ethanone,1-[2-[(6-O-D-apio-b-D-furanosyl-b-D-glucopyranosyl)oxy]-4-methoxyphenyl]-中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C20H28O12 分 子 量: 460.42912
