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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
貓細小病毒探針法熒光定量PCR試劑盒說明書
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 貨號:LZR3607
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-13
  • 更新日期: 2025-01-22
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號 LZR3607
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

貓細小病毒探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

Feline Parvovirus(FPV)

LZR3607

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環(huán)步驟

溫度

時間

循環(huán)數(shù)

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

馬克斯克魯維酵母MS (Melatonin Sulfate) ELISA Kit規(guī)格: 凍干物

鞘氨盒菌屬CNTN1 (Contactin 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Sphingopyxis  wooponensis

產(chǎn)氣腸桿菌TNKS1 (Tankyrase 1) ELISA Kit拉丁屬名: Enterobacter  aerogenes

假單胞菌屬PDGFB (Platelet Derived Growth Factor Subunit B) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudomonas prosekii

馬闊里類芽孢桿菌HIF-1α (Hypoxia Inducible Factor 1 Alpha) ELISA Kit拉丁屬名: Paenisporosarcina macmurdoensis

球孢白僵菌sTNF-1 (Soluble Tumor Necrosis Factor 1) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

枯草芽孢桿菌MUC7 (Mucin 7) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus  subtilis

球孢鏈霉菌CCR1 (CC-Chemokine Receptor 1) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces globisporus

平菇IGFBP-2 (Insulin Like Growth Factor Binding Protein 2) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

玫煙色棒束孢SAP25 (Synaptosome Associated Protein 25) ELISA Kit拉丁屬名: Isaria fumosorosea

污黑腐皮殼ABCA1(ATP-binding cassette transporter A1) ELISA Kit拉丁屬名: Valsa sordida Nitschke

熱帶假絲酵母Ntn4 (Netrin 4) ELISA Kit拉丁屬名: Candida tropicalis

大西洋魯杰氏菌EMILIN 1 (Elastin Microfibril Interface Located Protein 1) ELISA Kit拉丁屬名: Ruegeria atlantica

滑菇BMP-4 (Bone Morphogenetic Protein 4) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

缺陷短波單胞菌C3bR (Complement Fragment 3b Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Brevundimonas diminuta
貓細小病毒探針法熒光定量PCR試劑盒說明書SSX5  滑膜X斷點蛋白5抗體洋地黃毒苷Digitoxin中藥標準品  分 子 式: C41H64O13 分 子 量: 764.93906

STEAP4/TNFAIP9  α誘導蛋白9/六跨膜上皮抗原4抗體3,4,5-三甲氧基苯酚3,4,5-Trimethoxyphenol對照藥材 分 子 式: C9H12O4 分 子 量: 184.18918

STK31  絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶31抗體黃芩苷甲酯Baicalin methyl ester化學標準品 分 子 式: C22H20O11 分 子 量: 460.388

UTP14A/SDCCAG16  抗原16抗體鹽酸益母草堿Leonurine hydrochloride中藥標準品  分 子 式: C14H21N3O5 分 子 量: 311.33364

XAGE2  /睪丸抗原12家族2抗體細菌凍存液標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

ITIH1  衍生透明質(zhì)酸相關(guān)蛋白抗體丹酚酸A(R)-3-(3,4-Dihydroxyphenyl)-2-(((E)-3-(2-((E)-3,4-dihydroxystyryl)-3,4-dihydroxyphenyl)acryloyl)oxy)propanoic acid中藥標準品  分 子 式: C26H22O10 分 子 量: 494.44688

GBP5/Guanylate binding protein 5  鳥嘌呤核苷酸結(jié)合蛋白5抗體Earle's平衡鹽粉劑(1×EBSS,含鈣鎂糖)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

 


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