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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3610
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-13
- 更新日期： 2025-01-22
| 產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3610 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
博茲曼熒光桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格 | Fluoribacter bozemanae | LZR3610 |
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
擬卵蓋鵝膏菌LFA-1 (Lymphocyte Function Associated Antigen 1) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
釀酒酵母PC4 (Positive Cofactor 4) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
芽孢桿菌UBE2A (Ubiquitin Conjugating Enzyme E2A) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus reuszeri
大腸埃希氏桿菌PR3 (Proteinase 3) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia coli
葉生布勒擔子酵母FSP (Fibroblast Surface Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Bulleribasidium foliicola
枯草芽孢桿菌ADM (Adrenomedullin) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
Ensifer adhaerensCCSA-3 (Colon Cancer Specific Antigen-3) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
枯草芽孢桿菌DPYSL3 (Dihydropyrimidinase Like Protein 3) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
唐菖蒲伯克霍爾德氏菌PKCγ (Protein Kinase C Gamma) ELISA Kit 拉丁屬名: Burkholderia gladioli
膠孢IGFALS (Insulin Like Growth Factor Binding Protein, Acid Labile Subunit) ELISA Kit 拉丁屬名: Glomerella cingulata
宛氏擬青霉MT1M (Metallothionein 1M) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
釀酒酵母BLVRB (Biliverdin Reductase B) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
枯草芽胞桿菌Anti-AChR (Anti-Acetylcholine Receptor Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
釀酒酵母GP5 (Glycoprotein V, Platelet) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
串珠鐮孢*ERK1 (Extracellular Signal Regulated Kinase 1) ELISA Kit拉丁屬名: Fusarium moniliforme Sheldon
博茲曼熒光桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格EphA6/Eph receptor A6 酪氨酸蛋白激酶受體A6抗體靈芝酸FGanoderic acid E中藥標準品 分 子 式: C30H40O7 分 子 量: 512.6344
EphA7/Eph receptor A7 酪氨酸蛋白激酶受體A7抗體魚藤素Deguelin中藥標準品 分 子 式: C23H22O6 分 子 量: 394.41718
EphA8/Eph receptor A8 酪氨酸蛋白激酶受體A8抗體丹皮酚原苷C10715中藥標準品 分 子 式: C20H28O12 分 子 量: 460.42912
EphB1/Eph receptor B1 酪氨酸蛋白激酶受體B1抗體原*堿protopine中藥標準品 分 子 式: C20H19NO5 分 子 量: 353.37
phospho-EphB1/Eph receptor B1(Tyr317) 磷酸化酪氨酸蛋白激酶受體B1抗體姜酮zingerone中藥標準品 分 子 式: C11H14O3 分 子 量: 194.23
phospho-EphB1/Eph receptor B1(Tyr331) 磷酸化酪氨酸蛋白激酶受體B1抗體番瀉苷ASennoside A 中藥標準品 分 子 式: C42H38O20 分 子 量: 862.75
Kidins220 220kDa蛋白激酶D相互作用蛋白抗體歐當歸內(nèi)酯ALevistilide A中藥標準品 分 子 式: C24H28O4 分 子 量: 380.47672
