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客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析，提供實驗報告給您。

PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因，較佳地管家基因，優選地為RPPH1的擴增區域，其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產品：

肉色迷孔菌（可訂）CHAc (Choline acetylase) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

大腸埃希菌MLZE (Melanoma Derived Leucine Zipper Extra Nuclear Factor) ELISA Kit拉丁屬名: coli

極長鏈霉菌ANKRD1 (Ankyrin Repeat Domain 1) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces  longissimus

木醋桿菌COL11α1 (Collagen Type XI Alpha 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Acetobacter xylinum=Gluconacetobacter xylinus

巴斯德畢赤酵母PRB (Retinoblastoma Tumor Suppressor Protein) ELISA Kit用途: 高效表達、分泌、 葡聚糖酶

釀酒酵母TNF-β (Tumor Necrosis Factor Beta) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

紫色孢囊桿菌MAP2K1 (Mitogen Activated Protein Kinase Kinase 1) ELISA Kit拉丁屬名: Cystobacter violaceus

無FADS2 (Fatty Acid Desaturase 2) ELISA Kit拉丁屬名: Albidiferax ferrireducens

釀酒酵母Smad3/MADH3 (Mothers Against Decapentaplegic Homolog 3) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

膠凍樣芽胞桿菌PDGFC (Platelet Derived Growth Factor C) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

枯草芽孢桿菌12-HETE (12-Hydroxyeicosatetraenoic Acid) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus  subtilis

平田頭菇6-2DPD (Deoxypyridinoline) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

藤黃毛殼MIγ/CXCL9 (Monocyte Interferon Gamma Inducing Factor) ELISA Kit拉丁屬名: Chaetomium luteum

焦曲霉Pro-MMP-1 (pro-Matrix Metalloproteinase 1) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

釀酒酵母Tyk-2 (Tyrosine Kinase 2) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae
禽腺病毒E型探針法熒光定量PCR試劑盒規格ZNF420  鋅指蛋白420抗體檸檬酸2-Hydroxypropane-1,2,3-tricarboxylic acid hydrate中藥標準品  分 子 式: C6H8O7.H2O 分 子 量: 210.1388

ZNHIT1/CGBP1   細胞周期蛋白1結合蛋白抗體二乙酸-(+)-松脂醇酯(+)-Pinoresinol diacetate對照藥材 分 子 式: C24H26O8 分 子 量: 442.45844

p53AIP1  p53調節凋亡誘導蛋白1抗體幼枝含斷氧化馬錢子甙2H-Pyran-4-acetic acid,3-ethenyl-2-(b-D-glucopyranosyloxy)-3,4-dihydro-5-(methoxycarbonyl)-,(2S,3R,4S)-對照藥材 分 子 式: C17H24O11 分 子 量: 404.36586

APOL6  載脂蛋白樣蛋白6抗體表兒茶素3-O-(3''-O-甲基)沒食子酸酯Benzoic acid,3,4-dihydroxy-5-methoxy-,(2R,3R)-2-(3,4-dihydroxyphenyl)-3,4-dihydro-5,7-dihydroxy-2H-1-benzopyran-3-ylester化學標準品 分 子 式: C23H20O10 分 子 量: 456.3989

ARTS  凋亡相關蛋白TGFb信號抗體姜黃素Curcumin中藥標準品  分 子 式: C21H20O6 分 子 量: 368.38

Bif  Bax相互作用因子1抗體Tris-HCl緩沖液(1mol/L,pH7.0,RNase free)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

CLIC4  細胞內氯離子通道蛋白4抗體氧化表小檗堿Oxyepiberberine化學標準品 分 子 式:  分 子 量: