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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
弗朗西斯菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號:LZR3622
  • 價(jià)格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-13
  • 更新日期: 2025-01-21
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號 LZR3622
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號
是否進(jìn)口

PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時(shí)間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

 

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

弗朗西斯菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格

Francisella spp.

LZR3622


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

少根根霉GDH/GLDH (Glutamate dehydrogenase) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizopus arrhizus var. arrhizus

蟲草MAdCAM1 (Mucosal Addressin Cell Adhesion Molecule 1) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

黃曲霉SEMA7A (Semaphorin 7A) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus  flavus

松果鏈霉菌ETRB (Endothelin Receptor B) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces carpinensis

黑馬朗假絲酵母IL-11 (Interleukin 11) ELISA Kit拉丁屬名: Candida haemulonii

大腸埃希氏菌LAB7-2/CD86 (B-Lymphocyte Activation Antigen B7-2) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia coli

間型假絲酵母MYBPC3 (Myosin Binding Protein C, Cardiac) ELISA Kit拉丁屬名: Candida intermedia

雷丸菌Surv (Survivin) ELISA Kit拉丁屬名: Laccocephalum mylittae

蘇云金芽孢桿菌蠟螟亞種UBE2C (Ubiquitin Conjugating Enzyme E2C) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus thuringiensis subsp. galleriae

枯草芽孢桿菌MRC2 (Mannose Receptor C Type 2) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis

石楠炭疽病菌F9 (Coagulation Factor Ⅸ) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

白假絲酵母STAT4 (Signal Transducer and Activator of Transcription 4) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

蠟樣芽胞桿菌MAPK (Mitogen Activated Protein Kinase) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus cereus

黑曲霉TEP1 (Telomerase Associated Protein 1) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus  niger

三葉草根瘤菌OTF2B (Octamer Transcription Factor 2B) ELISA Kit用途: 與三葉草共生固氮
弗朗西斯菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格Adenylate Kinase 1/AK1  腺苷酸激酶-1抗體鹽酸胍溶液(8mol/L)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

CTNNBIP1  β鏈接素相互作用蛋白1抗體滇烏頭堿yunaconitine化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C35H49NO11 分 子 量: 659.768

phospho-CTNNBIP1 (Ser36)  磷酸化β鏈接素相互作用蛋白1抗體大麻酰胺D2,3-Naphthalenedicarboxamide,1,2-dihydro-7-hydroxy-1-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-N2,N3-bis[2-(4-hydroxyphenyl)ethyl]-6-methoxy-,(1R,2S)-rel-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C36H36N2O8 分 子 量:

phospho-CTNNBIP1 (Thr43/Ser50)  磷酸化β鏈接素相互作用蛋白1抗體西紅花苷IITricrocin中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C37H52O19 分 子 量: 800.797380000001

AKR1D1  醛固酮還原酶家族1成員D1抗體檸檬苦素limonin from citrus seeds中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C26H30O8 分 子 量: 470.52

ALDH1B1  乙醛脫氫酶5抗體酚酞溶液標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

ALDOB  醛縮酶2抗體聚谷氨酸紫杉醇CT-2103中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C47H51NO14.C5H9NO4 分 子 量: 1001.0354

 


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