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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3662
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-13
- 更新日期： 2025-01-21
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3662 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
禽嗜血桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格 | Haemophilus gallinarum | LZR3662 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
松口蘑Monkey MYL1 (Myosin Light Chain 1, Alkali, Fast Skeletal) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
巴斯德畢赤酵母Monkey CA153 (Carbohydrate Antigen 153) ELISA Kit用途: 分泌表達(dá)a-淀粉酶
近平滑假絲酵母Monkey CYSLTR2 (Cysteinyl Leukotriene Receptor 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Candida parapsilosis
糙皮側(cè)耳Monkey INS (Insulin) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
刺孢籃狀菌Monkey GAD-Ab (Anti-Glutamic Acid Decarboxylase antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Talaromyces aculeatus
美澳型核果褐腐病菌Monkey CENPA (Centromere Protein A) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
海境芽孢桿菌Monkey PTPRJ (Protein Tyrosine Phosphatase Receptor Type J) ELISA Kit拉丁屬名: Paraliobacillus sp.
大腸埃希菌Monkey PIIINP (N-Terminal Procollagen Ⅲ Propeptide) ELISA Kit拉丁屬名: coli
鄰單胞菌屬*Monkey PTPRN (Protein Tyrosine Phosphatase Receptor Type N) ELISA Kit拉丁屬名: Plesiomonas sp.
葡萄座腔菌Monkey TGF-β2 (Transforming Growth Factor β2) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
大腸埃希菌Monkey CDC23 (Cell Division Cycle Protein 23) ELISA Kit拉丁屬名: coli
動物源細(xì)菌耐藥性檢測板－金黃色葡菌球菌Monkey LILRB4 (Leukocyte Immunoglobulin Like Receptor Subfamily B Member 4) ELISA Kit規(guī)格: 96孔
矩圓黑盤孢Monkey sgp130 (soluble Glucoprotein 130) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
卡爾斯伯酵母Monkey MS (Melatonin Sulfate) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
黃曲霉Monkey CAM (Calmodulin) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus flavus
禽嗜血桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格KIF20A/MKLP2 有絲分裂驅(qū)動蛋白樣2抗體改良Ringer溶液(10×MMR,pH7.7)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
TRIM25 雌激素反應(yīng)鋅指蛋白抗體(R型)人參皂苷Rh2b-D-Glucopyranoside, (3b,12b,20R)-12,20-dihydroxydammar-24-en-3-yl中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C36H62O8 分 子 量: 622.87268
phospho-TRIM25(The91) 磷酸化雌激素反應(yīng)指狀蛋白抗體吳茱萸新堿(Z)-1-Methyl-2-(tridec-8-en-1-yl)quinolin-4(1H)-one中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C23H33NO 分 子 量: 339.51422
TIP47/M6PRBP1 脂滴相關(guān)蛋白TIP47抗體卡比多巴S-(-)-carbidopa中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C10H14N2O4 分 子 量: 226.23
TLS/FUS 粘液樣脂肪蛋白FUS1抗體Acr-Bis(30%:1.8%)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
KIF2B 有絲分裂驅(qū)動蛋白樣2B抗體葡萄糖溶液(20%,無菌)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
KLHL13 kelch樣蛋白13抗體羅漢果苷IIeb-D-Glucopyranoside, (3b,9b,10a,11a,24R)-11,25-dihydroxy-9-methyl-19-norlanost-5-ene-3,24-diylbis-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C42H72O14 分 子 量:
