產地 | 進口、國產 |
品牌 | 聯祖 |
貨號 | LZR3673 |
用途 | 公司產品僅用于科研 |
包裝規格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
單孢子蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒 | Haplosporidium spp. | LZR3673 |
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環步驟 | 溫度 | 時間 | 循環數 |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產品:
松鼠葡萄球菌Monkey GSP (Glycosylated Serum Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Staphylococcus sciuri
Pseudomonas batumici Monkey APAF-1 (Apoptosis Protease Activating Factor-1) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
少孢哈薩克斯坦酵母Monkey Aβ1-40 (Amyloid Beta Peptide 1-40) ELISA Kit拉丁屬名: Kazachstania exigua
玫煙色棒束孢Monkey C3bR (Complement Fragment 3b Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Isaria fumosorosea
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海假交替單胞菌Monkey PLSCR2 (Phospholipid Scramblase 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudoalteromonas marina
多主葡萄殼菌Monkey HYOU1 (Hypoxia Up Regulated 1) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
芽胞桿菌Monkey AIG1 (Androgen Induced Protein 1) ELISA Kit 用途: 分類、研究,具有處理富營養水體和養殖廢水潛力。
多粘類芽孢桿菌Monkey COL15 (Collagen Type XV) ELISA Kit 拉丁屬名: Paenibacillus polymyxa
金黃色葡萄球菌金黃亞種Monkey CD40L/TNFSF5 (Cluster of Differentiation 40 Ligand) ELISA Kit拉丁屬名: Staphylococcus aureus subsp. aureus
釀酒酵母Monkey EIPS2 (Estrogen Induced Protein pS2) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
枯草芽孢桿菌Monkey F12 (Coagulation Factor Ⅻ) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
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黃桿菌Monkey Grb2 (Growth Factor Receptor Bound Protein 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Flavobacterium sp.
單孢子蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒 NEK8 絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶NEK8抗體芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷-6'-乙酯7-O-beta-D-Glucuronoside,Et ester-4',5,7-Trihydroxyflavone中藥標準品 分 子 式: C23H22O11 分 子 量: 474.414
NSP5 核結構蛋白5抗體CTAB抽提液標準滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
n-Myc 致癌基因n-Myc抗體苦參醇XKushenol X化學標準品 分 子 式: C25H28O7 分 子 量: 440.48562
NUBP1 核苷酸結合蛋白1抗體改良臺氏液粉劑(無鈣)標準滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
NUBP2 核苷酸結合蛋白2抗體卵黃鹽水標準滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
NUP37 核孔蛋白Nup37抗體3-乙酰基-beta-乳香酸3-Acetyl-尾-boswellic acid化學標準品 分 子 式: C32H50O4 分 子 量: 498.737
PARD6B 缺陷性分配同源物β抗體10-去乙酰紫杉醇;7-表-去乙酰基紫杉醇Deacetyltaxol中藥標準品 分 子 式: C45H49NO13 分 子 量: 811.87