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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR3677
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-13
- 更新日期： 2025-01-21
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR3677 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
螺桿菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒 | Helicobacter spp. | LZR3677 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
威斯康星米勒菌Monkey GLα (Galactosidase Alpha) ELISA Kit拉丁屬名: Moellerella wisconsensis
大靑湖金黃桿菌Monkey FRS3 (Fibroblast Growth Factor Receptor Substrate 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Chryseobacterium daecheongense
塔賓曲霉Monkey M-AChR M3 (Muscarinic Acetylcholine Receptor M3) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus tubingensis
葡萄暗擬棒束梗霉Monkey PAI2 (Plasminogen Activator Inhibitor 2 )ELISA Kit 拉丁屬名: Phaeoisariopsis vitis (Lév.) Sawada
中國(guó)漢納酵母Monkey CA6 (Carbonic Anhydrase VI) ELISA Kit拉丁屬名: Hannaella sinensis
沙福芽孢桿菌Monkey FPB (Fibrinopeptide B) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus safensis
大豆慢生根瘤菌Monkey CK-17/KRT17 (Cytokeratin 17) ELISA Kit用途: 與大豆共生固氮,培養(yǎng)基pH4.5生長(zhǎng)
希瓦氏菌*Monkey pIκBα (Phospho-Inhibitory Subunit Of NF Kappa B Alpha) ELISA Kit 拉丁屬名: Shewanella putrefaciens
白乳菇Monkey MAN1A1 (Mannosidase Alpha Class 1A Member 1) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
Termitomyces bulborhizus Monkey MLCK/MYLK (Myosin Light Chain Kinase) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
白假絲酵母Monkey CTSC (Cathepsin C) ELISA Kit拉丁屬名: Candida albicans
米根霉Monkey SIGLEC12 (Sialic Acid Binding Ig Like Lectin 12) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizopus oryzae Went et Prinsen-Geerligs
雞毒、滑液支原體（-）陰性血清Monkey AMY1 (Amylase Alpha 1, Salivary) ELISA Kit規(guī)格: 0.5ml
耐冷冷桿菌Monkey iPLA2 (Phospholipidase A2, Calcium Independent) ELISA Kit拉丁屬名: Cryobacterium psychrotolerans
臭曲霉Monkey CNTN3 (Contactin 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus foetidus
螺桿菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒 phospho-NUDC(Ser326) 磷酸化細(xì)胞核分離基因C蛋白抗體茄尼醇solanesol中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C45H74O 分 子 量: 631.06846
NUP160 核孔蛋白NUP160抗體馬兜鈴內(nèi)酰胺BIIIDibenz[cd,f]indol-4(5H)-one,1,2,9-trimethoxy- 化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C18H15NO4 分 子 量: 309.316
Ninein/GSK3B interacting protein GSK3B相互作用蛋白抗體地黃苷Martynoside對(duì)照藥材 分 子 式: C31H40O15 分 子 量: 652.6403
RASSF7 RAS家族關(guān)聯(lián)結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體磺胺醋酰N-((4-Aminophenyl)sulfonyl)acetamide 高端化學(xué)試劑 分 子 式: C8H10N2O3S 分 子 量: 214.2416
SKA1 紡錘體和著絲粒相關(guān)蛋白1抗體鉤吻素子7,20(2H,19H)-Cyclovobasan, 1,2,18,19-tetradehydro-3,17-epoxy-, (3R,7alpha,20alpha)-中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C20H22N2O 分 子 量: 306.40148
SKA2 紡錘體和著絲粒相關(guān)蛋白2抗體黃芩苷Baicalin中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C21H18O11 分 子 量: 446.36
SKA3 紡錘體和著絲粒相關(guān)蛋白3抗體馬兜鈴內(nèi)酰胺AAdenosine,2'-deoxy-N-(5,6-dihydro-8-methoxy-5-oxobenzo[f]-1,3-benzodioxolo[6,5,4-cd]indol-7-yl)-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C27H22N6O7 分 子 量: 542.49958
