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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
病毒B型探針法熒光定量PCR試劑盒
  • 品牌:聯祖
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:LZR3681
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-13
  • 更新日期: 2025-01-21
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 聯祖
貨號 LZR3681
用途 公司產品僅用于科研
包裝規格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產品名稱

英文名稱

貨號

病毒B型探針法熒光定量PCR試劑盒

Hepatitis B Virus(HBV)

LZR3681

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環步驟

溫度

時間

循環數

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產品:

白地霉Monkey CTAGE (Cutaneous T-Cell Lymphocyte Associated Antigen) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

柱孢犁頭霉Monkey ATF-5 (Activating Transcription Factor 5) ELISA Kit拉丁屬名: Absidia cylindrospora

土生類諾卡氏菌Monkey MGST1 (Microsomal Glutathione S Transferase 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Nocardioides  terrigena

香豌豆束莖病菌Monkey MMP-25 (Matrix Metalloproteinase 25) ELISA Kit用途: Produces 5'-nucleotides by cell culture on hydrocarbons and subsequent degradation of intracellular RNA at alkaline pH (U.S. Pat. 3,652,395).

綠粘帚霉Monkey OCLN (Occludin) ELISA Kit  注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

枯草芽胞桿菌Monkey TNC (Tenascin C) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus  subtilis

檸檬色短小桿菌Monkey EPP (Erythrocyte Protoporphyrin) ELISA Kit拉丁屬名: Curtobacterium  citreum

鐮刀菌Monkey IgA1 (Immunoglobulin A1) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

豬絲菌Monkey MSTN (Myostatin) ELISA Kit拉丁屬名: rhuriopathiae

釀酒酵母Monkey EGFR (Epidermal Growth Factor Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae

蘇云金芽胞桿菌Monkey UFC (Urinary Free Cortisol) ELISA Kit用途: 用于抗蟲基因的分離和抗蟲相關基礎研究。

盤長孢狀刺盤孢Monkey PDGFC (Platelet Derived Growth Factor C) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

枯草芽孢桿菌Monkey GPR120 (G Protein Coupled Receptor 120) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis

異常漢遜酵母Monkey CFB (Complement Factor B) ELISA Kit 拉丁屬名: Hansenula  anomala

枯草芽孢桿菌Monkey COL17 (Collagen Type XVII) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus  subtilis
病毒B型探針法熒光定量PCR試劑盒 MRP8+MRP14  多藥耐藥相關蛋白8/9/14抗體槐黃醇Sophoflavescenol化學標準品 分 子 式:  分 子 量:

NEU4  神經氨酸酶4抗體香蒲新苷Typhaneoside中藥標準品  分 子 式: C34H42O20 分 子 量: 770.68

PPHLN1  脈周蛋白1抗體(抗原蛋白Ga50)異莪術呋喃二烯Cyclodeca[b]furan,4,7,8,11-tetrahydro-3,6,10-trimethyl-, (5E,9E)-對照藥材 分 子 式: C15H20O 分 子 量: 216.3187

S100 alpha 2  S100A2抗體甲基條葉薊素; 澤蘭黃素4,5-Dihydroxy-3,6,7-trimethoxyflavone化學標準品 分 子 式: C18H16O7 分 子 量: 344.31544

SART1  T淋巴細胞識別的抗原抗體月桂酸Lauric acid其它化學試劑 分 子 式: C12H24O2 分 子 量: 200.32

SCEL  SCEL蛋白抗體通關藤苷ITenacissoside I中藥標準品  分 子 式: C44H62O14 分 子 量:

SPAG8  精子相關抗原8抗體枯名醛4-Isopropylbenzaldehyde化學標準品 分 子 式: C10H12O 分 子 量: 148.20168


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