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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3721
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-13
- 更新日期： 2025-01-21
| 產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3721 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
人病毒16探針法熒光定量PCR試劑盒 | Human Papillomavirus 16(HPV-16) | LZR3721 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
枯草芽胞桿菌Monkey GP-73 (Golgi Protein 73) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
釀酒酵母Monkey M-AChR (Muscarinic Acetylcholine Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
朱紅叢赤殼Monkey GHR (Growth Hormone Receptor) ELISA Kit 拉丁屬名: Nectria cinnabarina
長雙歧桿菌Monkey ANGPTL2 (Angiopoietin Like Protein 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Bifidobacterium longum
小單孢菌Monkey AIM2 (Absent In Melanoma 2) ELISA Kit拉丁屬名: Micromonospora sp.
枯草芽孢桿菌Monkey GP4 (Platelet Membrane Glycoprotein IV) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
釀酒酵母Monkey PPAR-δ (Peroxisome Proliferator Activated Receptor Delta) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
刺孢籃狀菌Monkey MUC5AC (Mucin 5 Subtype AC) ELISA Kit拉丁屬名: Talaromyces aculeatus
殼菌Monkey UGCG (UDP-glucose ceramide glucosyltransferase) ELISA Kit用途: 植物病原物；用于該菌種群演化與流行學(xué)監(jiān)測。
干草寒冷桿菌Monkey FABP1 (Fatty Acid Binding Protein 1, Liver) ELISA Kit拉丁屬名: Frigoribacterium faeni
大腸埃希氏菌Monkey GUSβ (β-glucuronidase) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia coli
沼澤紅假單胞菌Monkey PLA2G12B (Phospholipase A2, Group XII B) ELISA Kit拉丁屬名: Rhodopseudomonas palustris
納塔爾鏈霉菌Monkey FE (Ferritin) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces barkulensis
大腸埃希氏菌Monkey UreC (Urease Related Protein C) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia coli
四脊裸胞殼Monkey GTEAGE (Glomerular Tissue Extract Advanced Glycosylation End Products) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
人病毒16探針法熒光定量PCR試劑盒 FAM50A FAM50A蛋白抗體水飽和酚(Phenol Water)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
FAM134C FAM134C蛋白抗體大黃素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷1-Hydroxy-3-methoxy-6-methyl-8-(((2S,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)tetrahydro-2H-pyran-2-yl)oxy)anthracene-9,10-dione中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C22H22O10 分 子 量: 446.40408
Histone H2A.Z/ H2AFZ 組蛋白H2AZ抗體達卡巴嗪dacarbazine中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C6H10N6O 分 子 量: 182.18
GM130 高爾基體自身蛋白GM130抗體Orth固定液標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
FBRSL1 病毒X蛋白反轉(zhuǎn)錄蛋白9抗體梔子苷Geniposid中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C17H24O10 分 子 量: 388.37
GMRP1/BTBD10 糖代謝相關(guān)蛋白1抗體硫酸阿托品atropine sulphate化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: 2(C17H23NO3).H2SO4 分 子 量: 676.82
BTBD1/HCV NS5A transactivated protein 8 丙毒NS5A反轉(zhuǎn)錄蛋白8抗體普拉洛芬Pranoprofen中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C15H13NO3 分 子 量: 255.27
