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客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析，提供實驗報告給您。

PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因，較佳地管家基因，優選地為RPPH1的擴增區域，其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產品：

弗氏鏈霉菌Monkey CCKAR (Cholecystokinin A Receptor) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces fradiae

天花板節桿菌Monkey CLDN9 (Claudin 9) ELISA Kit 拉丁屬名: Arthrobacter tecti

亞黑管孔菌Monkey NOS2/iNOS (Nitric Oxide Synthase 2, Inducible) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

貝倫格葡萄座腔菌梨生?；?/span>Monkey PRF1 (Perforin 1/Pore-Forming Protein) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

釀酒酵母Monkey LATS (Long Acting Thyroid Stimulator) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

美澳型核果褐腐病菌Monkey FSHR (Follicle Stimulating Hormone Receptor) ELISA Kit 拉丁屬名: Monilinia fructicola

產皮歐(票)霉素鏈霉菌Monkey ACP3/PAP (Prostatic Acid Phosphatase 3) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces   piomogenes

奧氏蜜環菌Monkey PDHβ (Pyruvate Dehydrogenase Beta) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

釀酒酵母Monkey Neopterin ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae Hansen

石泉海源菌Monkey sFMC (Soluble Fibrin Monomer Complex) ELISA Kit拉丁屬名: Idiomarina fontislapidosi

猴假單胞菌Monkey FAS/CD95/TNFRSF6 (Factor Related Apoptosis) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudomonas simiae

鹽漬喜鹽芽孢桿菌Monkey LDHC (Lactate Dehydrogenase C) ELISA Kit 拉丁屬名: Halobacillus salinus

聚團屈撓桿菌Monkey MYC (V-Myc Myelocytomatosis Viral Oncogene Homolog) ELISA Kit拉丁屬名: Flexibacter  tractuosus

菊池鏈格孢Monkey NAIP (Neuronal Apoptosis Inhibitory Protein) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

弗雷德里克斯堡假單胞菌Monkey AP62A (Anti-P62 Antibody)  ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudomonas  frederiksbergensis
阿古尼嗜血桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒供應商ASB3  錨蛋白重復序列-細胞因子信號抑制物盒蛋白家族3抗體Sorensen磷酸緩沖液(1×,pH6.2)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

EIF2C1/Ago1  真核翻譯起始因子2C1抗體乙酸鈉溶液(3mol/L,pH6.0,無菌)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

Anillin  胞環蛋白肌動蛋白結合蛋白抗體pH標準緩沖溶液(pH=4.00)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

BIN3  細胞骨架銜接蛋白BIN3抗體丁香亭-3-O-葡糖苷4H-1-Benzopyran-4-one,3-(b-D-glucopyranosyloxy)-5,7-dihydroxy-2-(4-hydroxy-3,5-dimethoxyphenyl)-化學標準品 分 子 式: C23H24O13 分 子 量: 508.42886

CCDC11  卷曲螺旋結構域蛋白11抗體雌三醇 3-葡萄糖醛酸苷b-D-Glucopyranosiduronic acid, (16a,17b)-16,17-dihydroxyestra-1,3,5(10)-trien-3-yl化學標準品 分 子 式: C24H32O9 分 子 量:

CDC3/CDC10/Septin 7  細胞周期調控因子3抗體三甲基氯化錫Trimethyltin chloride化學標準品 分 子 式: C3H9ClSn 分 子 量: 199.27

CEP55  中心體蛋白55kDa抗體胰蛋白酶溶液(0.1%)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量: