- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào):LZR3737
- 價(jià)格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-13
- 更新日期: 2025-01-21
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號(hào) | LZR3737 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
人類嗜淋巴細(xì)胞病毒2型前病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 | Human T-cell Lymphoma Virus Provirus(HTLV-2) | LZR3737 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
糖化酵母Monkey CYPB (Cyclophilin B) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces diastaticus
側(cè)耳Monkey IL-12 p40 (Interleukin 12 p40) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
綠色木霉Monkey ApoA2 (Apolipoprotein A2) ELISA Kit拉丁屬名: Trichoderma viride
芽孢桿菌屬Monkey IFN-β (Interferon Beta) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus sp.
硬毛栓孔菌Monkey DBP (DNA Binding Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Trametes trogii
拜氏色鹽桿菌Monkey RNASET2 (Ribonuclease T2) ELISA Kit 拉丁屬名: Chromohalobacter beijerinckii
多根硬皮馬勃Monkey COMP (Cartilage Oligomeric Matrix Protein) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
釀酒酵母Monkey CVL/EZR (Cytovillin/Ezrin) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae Hansen
平菇Monkey OSCAR (Osteoclast Associated Receptor) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
芽枝狀枝孢Monkey GAL14 (Galectin 14 ) ELISA Kit 拉丁屬名: Cladosporium cladosporioides
小馬勃Monkey PPAR-α (Peroxisome Proliferator Activated Receptor Alpha) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
溶藻弧菌Monkey TALLA-1 (T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia Antigen) ELISA Kit拉丁屬名: Vibrio alginolyticus
蟬花*Monkey TFF3 (Trefoil Factor 3, Intestinal ) ELISA Kit拉丁屬名: Isaria cicadae Miq.
哈茨木霉Monkey OBTF2 (Octamer Binding Transcription Factor 2) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
閃光須霉Monkey FRA (Fibronection Related Antigen) ELISA Kit拉丁屬名: Phycomyces nitens
人類嗜淋巴細(xì)胞病毒2型前病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 DEPTOR/DEPDC6 DEPTOR蛋白抗體八氫姜黃素Octahydrocurcumin中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C21H28O6 分 子 量: 376.44342
DIAPH1 常染色體顯性遺傳相關(guān)蛋白1抗體(E)-3'-羥基-4'-甲氧基肉桂酸甲酯Methyl (E)-3'-hydroxy-4'-methoxycinnamate化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C11H12O4 分 子 量: 208.21
TBX1/Brachyury 先心病相關(guān)蛋白TBX1抗體黃芩酸Olean-12-en-28-oicacid, 3,23-dihydroxy-, (3a,4b)-對(duì)照藥材 分 子 式: C30H48O4 分 子 量: 472.69972
DGCR2 DGCR2蛋白抗體羥胺溶液(1.5mol/L,pH8.5)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
DHPS 脫氧輔合酶蛋白抗體5'-香葉基-5,7,2',4'-四羥基黃酮5'-geranyl-5,7,2',4'-tetrahydroxyflavone化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C25H26O6 分 子 量: 422.47
DHPS1 短鏈脫氫還原酶1抗體隱綠原酸Cryptochlorogenic acid中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C16H18O9 分 子 量: 354.31
DHRS13 短鏈脫氫還原酶13抗體斯皮諾素spinosin中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C28H32O15 分 子 量: 608.54468