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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3756
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-13
- 更新日期： 2025-01-21
| 產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3756 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
錦鯉病毒基因探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商 | Koi Herpesvirus(KHV)Sph | LZR3756 |
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
絲狀支原體山羊亞種Monkey NT-3 (Neurotrophin-3) ELISA Kit 拉丁屬名: mycoides subsp capri
晶粒鬼傘Monkey PPP1R1A (Protein Phosphatase 1 Regulatory Subunit A) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
青色鏈霉菌Monkey NAP (Neutrophil Alkaline Phosphatase) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces glaucus
青霉Monkey HSF1 (Heat Shock Transcription Factor 1) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
血桿菌Monkey MIγ/CXCL9 (Monocyte Interferon Gamma Inducing Factor) ELISA Kit拉丁屬名: Sanguibacter sp.
三葉膠灰星菌Monkey NEFL (Neurofilament, Light Polypeptide) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
假灰鏈霉菌Monkey PDGF-BB (Platelet Derived Growth Factor-BB) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces pseudogriseolus
佛雷德里克斯堡假單胞菌Monkey GM (Gastric Mucin) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas frederiksbergensis
戴爾福特菌屬Monkey TD-Ag (Thymus Dependent Antigen) ELISA Kit拉丁屬名: Delftia sp.
大腸埃希氏菌Monkey MCSP (Melanoma Associated Chondroitin Sulfate Proteoglycan) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia coli
長根靜灰球菌Monkey CRH (Corticotropin Releasing Hormone) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
虎掌菌*Monkey PCDHβ16 (Protocadherin Beta 16) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
枯草芽孢桿菌Monkey AQP-2 (Aquaporin 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus subtilis
病毒Monkey cTnT/TNNT2 (Troponin T Type 2, Cardiac) ELISA Kit拉丁屬名: Infectious bronchitis virus
FormosaMonkey Ank-B (Ankyrin B) ELISA Kit拉丁屬名: Formosa sp.
錦鯉病毒基因探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商UBE2U 泛素蛋白連接酶U抗體二苯胺試劑(1%)標準滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
UBE2W 泛素蛋白連接酶W抗體皂草苷； 皂草黃苷4H-1-Benzopyran-4-one,6-b-D-glucopyranosyl-7-(b-D-glucopyranosyloxy)-5-hydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)-化學(xué)標準品 分 子 式: C27H30O15 分 子 量:
CBLL1/Ecadherin binding protein E7 上皮鈣粘附分子結(jié)合蛋白E77-木糖苷兒茶酚2-[2-(3,4-dihydroxyphenyl)-3,5-dihydroxy-chroman-7-yl]oxyoxane-3,4,5-triol對照藥材 分 子 式: C20H22O10 分 子 量: 422.38268
BTRC2/beta TRCP2 BTRC2蛋白抗體水飛薊汀Silicristin中藥標準品 分 子 式: C25H22O10 分 子 量: 482.44
WDR23 WDR23蛋白抗體戈米辛O6-epi-gomisin O化學(xué)標準品 分 子 式: C23H28O7 分 子 量: 416.46422
SKP1 S期激酶相關(guān)蛋白1抗體黃卡瓦胡椒素 A1-(2-Hydroxy-4,6-dimethoxyphenyl)-3-(4-methoxyphenyl)prop-2-en-1-one對照藥材 分 子 式: C18H18O5 分 子 量: 314.33252
SHFM3 SHFM3蛋白抗體山梔子苷Bgardenoside中藥標準品 分 子 式: C17H24O11 分 子 量: 404.37
