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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR3743
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-13
- 更新日期： 2025-01-21
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR3743 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
牛鼻病毒探針?lè)晒舛縋CR試劑盒說(shuō)明書 | Infectious Bovine Rhinotracheitis Virus(IBRV) | LZR3743 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
*勝利油田熱甲烷微球菌Monkey HHIP (Hedgehog Interacting Protein) ELISA Kit 拉丁屬名: Methermicoccus shengliensis
黑曲霉Monkey PRKG1 (Protein Kinase, cGMP Dependent Type I) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus niger
異配囊接霉Monkey GLTP (Glycolipid Transfer Protein) ELISA Kit 拉丁屬名: Mucor heterogamus
熱帶鹽水孢菌Monkey PLN (Phospholamban) ELISA Kit拉丁屬名: Salinispora tropica
大腸桿菌Monkey CA12 (Carbonic Anhydrase XII) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
Wautersiella falseniiMonkey α-SCA (α-sarcomeric Actin) ELISA Kit拉丁屬名: Wautersiella falsenii
假單胞菌Monkey SAA2 (Serum Amyloid A2) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas vranovensis
新月彎孢霉Monkey AGRN (Agrin) ELISA Kit拉丁屬名: Cochliobolus lunatus
橡膠樹假絲酵母Monkey TACR2 (Tachykinin Receptor 2) ELISA Kit拉丁屬名: Candida heveicola
水生黃桿菌Monkey GREM1 (Gremlin 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Flavobacterium hydatis
日本根霉Monkey Try2 (Trypsinogen II) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizopus japonicus
嗜熱鏈球菌Monkey MX1 (Myxovirus Resistance 1) ELISA Kit拉丁屬名: Streptococcus thermophilus
多主葡萄殼菌Monkey HSP-70/HSPA9 (Heat Shock Protein 70) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
海泥黃桿菌Monkey LAT (Linker For Activation of T-cell) ELISA Kit拉丁屬名: Flavobacterium oceanosedimentum
粗皮側(cè)耳（平菇）Monkey IκBβ (Inhibitory Subunit of NF Kappa B Beta) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
牛鼻病毒探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒說(shuō)明書DPP9/DPRP2 二肽基肽酶9抗體竹紅菌丙素1H-Cyclohepta[ghi]perylene-6,11-dione,3-acetyl-5,12-dihydroxy-4,8,9,13-tetramethoxy-2-methyl- (9CI)化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C30H24O9 分 子 量:
DPP8/DPRP1 二肽基肽酶8抗體連翹脂素Phenol,4-[(1S,3aR,4R,6aR)-4-(3,4-dimethoxyphenyl)tetrahydro-1H,3H-furo[3,4-c]furan-1-yl]-2-methoxy- 中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C21H24O6 分 子 量:
Matriptase 2 膜型絲氨酸蛋白酶2抗體野菊花內(nèi)酯Yejuhualactone中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C32H40O8 分 子 量: 552.6552
CYBR1 細(xì)胞色素B還原酶1抗體氯化鋰溶液(1mol/L,無(wú)菌)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
UQCRC1 輔酶細(xì)胞色素C還原酶核心蛋白1抗體番瀉苷CSennoside C中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C42H40O19 分 子 量: 848.755600000001
TXNRD1 硫氧環(huán)蛋白還原酶1抗體蛋白快速銀染試劑盒標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
PRDX2/Peroxiredoxin-SO3 硫氧還蛋白過(guò)氧化物酶2碳酸氫鈉溶液(7.4%)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
