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客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。

PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：

香栓孔菌Monkey FSCN (Fascin) ELISA Kit拉丁屬名: Trametes suaveolens

耐鹽考克氏菌Monkey COL10 (Collagen Type X) ELISA Kit 拉丁屬名: Kocuria  halotolerans

地下鹽單胞菌Monkey MAP2K1 (Mitogen Activated Protein Kinase Kinase 1) ELISA Kit拉丁屬名: Halomonas subterranea

蘇云金芽孢桿菌Monkey DEFα1 (Defensin Alpha 1, Neutrophil) ELISA Kit用途: 害蟲生物防治

殼菌Monkey TP53 (Tumor Protein p53) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

變粉紅鎖擲孢酵母Monkey TDP43 (Tar DNA Binding Protein 43KDa )ELISA Kit 拉丁屬名: Sporidiobolus metaroseus

污黑腐皮殼Monkey GSTα1 (Glutathione S Transferase Alpha 1) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

類干酪乳桿菌Monkey PCIII (Procollagen III) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus  paracasei

金黃色葡萄球菌Monkey LRP6 (Low Density Lipoprotein Receptor Related Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Staphylococcus aureus

紅色雷夫松氏菌Monkey NOX1 (Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate Oxidase 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Leifsonia rubra

水生拉恩氏菌Monkey ACVA (Activin A) ELISA Kit拉丁屬名: Rahnella aquatilis

博韋環(huán)紋炭團菌Monkey SOD2 (Superoxide Dismutase 2, Mitochondrial) ELISA Kit 拉丁屬名: Annulohypoxylon bovei

釀酒酵母Monkey C8b (Complement Component 8b) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

大腸埃希氏桿菌Monkey GM-CSF Ab (Anti-Granulocyte Macrophage Colony Stimulating Factor Antibody) ELISA Kit 拉丁屬名: Escherichia  coli

中國木霉Monkey LFA-2/CD2 (Lymphocyte Function Associated Antigen 2) ELISA Kit拉丁屬名: T.sinensis
脾腎壞死病病毒探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格HDHD2/IER3IP1  HDHD2蛋白抗體康普瑞汀A-1(Z)-3-Methoxy-6-(3,4,5-trimethoxystyryl)benzene-1,2-diol中藥標準品  分 子 式: C18H20O6 分 子 量: 332.3478

HDHD3  HDHD3蛋白抗體前杯莧甾酮Stigmast-7-en-26-oicacid, 2,3,14,20,22,28-hexahydroxy-6-oxo-, d-lactone, (2b,3b,5b,22R,24S,25S,28R)-中藥標準品  分 子 式: C29H44O8 分 子 量:

HDHD2B/LHPP  HDHD2B蛋白抗體辛弗林鹽酸鹽4-(1-Hydroxy-2-(methylamino)ethyl)phenol hydrochloride中藥標準品  分 子 式: C9H13NO2.HCl 分 子 量: 203.66596

HEATR3  HEATR3蛋白抗體13-羥基氧化小檗堿13-Hydroxyoxyberberine化學標準品 分 子 式:  分 子 量:

HEATR6  增強蛋白抗體醋酸辛酯Octyl acetate中藥標準品  分 子 式: C10H20O2 分 子 量: 172.27

Proteasome 19S S5A  26S蛋白酶調(diào)節(jié)亞型S*抗體磺胺乙酰鈉Sulfacetamide sodium化學標準品 分 子 式: C8H9N2NaO3S 分 子 量: 236.22

Headpin/SERPINB13  絲氨酸蛋白酶抑制劑13抗體球松素5-Hydroxy-7-methoxy-2-phenylchroman-4-one對照藥材 分 子 式: C16H14O4 分 子 量: 270.27996