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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3758
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-13
- 更新日期： 2025-01-21
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3758 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
七星庫道蟲探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格 | Kudoa septempunctata | LZR3758 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
橙色桿菌屬Monkey CNTNAP4 (Contactin Associated Protein 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Sandarakinorhabdus arctica
貝倫格葡萄座腔菌梨生專化型Monkey PHC (Primary Hepatic Carcinoma)ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
豌豆根瘤菌Monkey LTD4 (Leukotriene D4) ELISA Kit用途: 與豌豆共生固氮
氧化節(jié)桿菌Monkey GOD (Glucose Oxidase) ELISA Kit拉丁屬名: Arthrobacter oxydans
細(xì)孢毛霉Monkey PMN Elastase (Polymorphonuclear Elastase) ELISA Kit拉丁屬名: Mucor subtilissimus
植物乳桿菌植物亞種Monkey DHEA-S7 (Dehydroepiandrosterone S7) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus plantarum subsp. plantarum
吸水鏈霉菌Monkey ALT (Alanine Transaminase) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces hygroscopicus
pMV306hsp+LuxG13（addgene26161）Monkey SYP (Synaptophysin) ELISA Kit拉丁屬名: pMV306hsp+LuxG13（addgene26161）
豌豆根瘤菌Monkey C4b (Complement Component 4b) ELISA Kit用途: 與豌豆、蠶豆、苕子共生固氮
枯草芽孢桿菌Monkey PIK3Cσ (Phosphoinositide-3-Kinase Catalytic Delta Polypeptide) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
立枯絲核菌Monkey CRY1 (Cryptochrome 1) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
多主葡萄殼菌Monkey CMLC-1 (Cardiac Myosin Light Chains 1) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
食鹿角菜假交替單胞菌Monkey β2-GP (Beta2 Glycoprotein) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudoalteromonas carrageenovora
番茄枯萎病菌Monkey TIMP-4 (Tissue Inhibitors of Metalloproteinase 4) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
膠凍樣類芽孢桿菌Monkey ERα (Estrogen Receptor Alpha) ELISA Kit 拉丁屬名: Paenibacillus mucilaginosus
七星庫道蟲探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格BTBD10 BTB/POZ結(jié)構(gòu)域蛋白10抗體原薯蕷皂苷Protodioscin中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C51H84O22 分 子 量: 1049.19946
BTBD17 BTB/POZ結(jié)構(gòu)域蛋白17抗體羥基酪醇醋酸酯Hydroxytyrosol acetate中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C10H12O4 分 子 量: 196.202
ANGL2/ANGPTL2 生成素樣蛋白2抗體氯化飛燕草素-3,5-O-二葡萄糖苷1-Benzopyrylium,3,5-bis(b-D-glucopyranosyloxy)-7-hydroxy-2-(3,4,5-trihydroxyphenyl)-,chloride (1:1)化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C27H31O17+.Cl- 分 子 量: 662.97784
BTBD19 BTB/POZ結(jié)構(gòu)域蛋白19抗體千層紙素A-7-0-β-D-葡萄糖醛酸苷Oroxyloside中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C22H20O11 分 子 量: 460.3876
GCLC/GCLM γ谷氨酰半胱氨酸合成酶抗體（γ-GCSc）5-羥基-4,7-二甲氧基黃酮5-Hydroxy-7-methoxy-2-(4-methoxyphenyl)-4H-chromen-4-one對照藥材 分 子 式: C17H14O5 分 子 量: 298.29006
GCOM1 GCOM1蛋白抗體澤瀉醇 E 23-醋酸酯Alisol E 23-acetate化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: 分 子 量:
OGFOD2 末端多聚腺苷酸2蛋白抗體D-山梨醇(2R,3R,4R,5S)-Hexane-1,2,3,4,5,6-hexaol中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C6H14O6 分 子 量: 182.17176
