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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
問號鉤端螺旋體探針法熒光定量PCR試劑盒說明書
  • 品牌:聯祖
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:LZR3771
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-13
  • 更新日期: 2025-01-21
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 聯祖
貨號 LZR3771
用途 公司產品僅用于科研
包裝規格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環步驟

溫度

時間

循環數

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

 

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。

產品名稱

英文名稱

貨號

問號鉤端螺旋體探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

Leptospira interrogans

LZR3771


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

以下列是公司正在熱銷的產品:

加利福尼亞擬威爾酵母Monkey CA125 (Carbohydrate Antigen 125) ELISA Kit  拉丁屬名: Williopsis californica

竹生炭角菌Monkey CK-19/KRT19 (Cytokeratin 19) ELISA Kit拉丁屬名: Xylaria bambusicola

雪腐微座孢Monkey ACTN2 (Actinin Alpha 2) ELISA Kit拉丁屬名: Microdochium nivale

發酵乳桿菌Monkey EFNA1 (Ephrin A1) ELISA Kit 拉丁屬名: Lactobacillus  fermentum

毛地黃殼針孢Monkey VASPIN (Visceral Adipose Specific Serine Protease Inhibitor) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

彎孢菌Monkey PLA1 (Phospholipase A1) ELISA Kit用途: 研究

匍匐曲霉原變種Monkey PGDS (Prostaglandin D Synthase) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus repens var. repens

金橙黃微小桿菌Monkey APP (Amyloid Precursor Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Exiguobacterium aurantiacum

芽孢桿菌Monkey FAK (Focal Adhesion Kinase) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus atrophaeus

短波單胞菌屬Monkey BTA (Bladder Tumor Antigen) ELISA Kit拉丁屬名: Brevundimonas staleyi

青春雙歧桿菌Monkey EAR3 (Eosinophil Associated Ribonuclease A family Member 3) ELISA Kit拉丁屬名: Bifidobacterium  adolensentis

匍枝根霉原變種Monkey BMP-2 (Bone Morphogenetic Protein 2) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizopus stolonifer var. stolonifer

枯草芽孢桿菌Monkey FOXP1 (Forkhead Box Protein P1) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus  subtilis

藤黃淺藤黃鏈霉菌Monkey NXF1 (Nuclear RNA Export Factor 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces luteolutescens

雜色曲霉Monkey PEX2 (Peroxisomal Biogenesis Factor 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus versicolor
問號鉤端螺旋體探針法熒光定量PCR試劑盒說明書RFESD  RFESD蛋白抗體磷酸三鈉洗液(5%)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

RENBP  腎素結合蛋白抗體齒孔酸; 齒孔菌酸Lanost-8-en-21-oicacid, 3-hydroxy-24-methylene-, (3b)-化學標準品 分 子 式: C31H50O3 分 子 量: 470.7269

REG1β/REG1 beta  胰島因子β抗體馬錢苷酸LOGANIC ACID中藥標準品  分 子 式: C16H24O10 分 子 量: 376.36

RED/CSA2  軟相關蛋白2抗體郁金二酮4-Cyclohepten-1-one,6-methyl-2-(1-methylethylidene)-5-(3-oxobutyl)-, (6S)-化學標準品 分 子 式: C15H22O2 分 子 量:

ANGPT3/ANG3/ANGPT4/ANG4  生成素3/生成素4抗體Tris緩沖鹽溶液(0.05mol/L,pH8.0)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

RFTN2  RFTN2蛋白抗體DL-苯丙氨酸DL-Phenylalanine化學標準品 分 子 式: C9H11NO2 分 子 量: 165.18914

RGAG4  RGAG4蛋白抗體水楊酸2-Hydroxybenzoic acid中藥標準品  分 子 式: C7H6O3 分 子 量: 138.12074

 


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