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客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。

PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：

橄欖色盤多毛孢Monkey CHD5 (Chromodomain Helicase DNA Binding Protein 5) ELISA Kit拉丁屬名: Pestalotia olivacea

腐皮鐮孢Monkey MPIF2 (Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 2) ELISA Kit拉丁屬名: Fusarium solani

大腸埃希氏菌Monkey  PSAP (Prosaposin) ELISA Kit 拉丁屬名: Escherichia  coli

香菇Monkey D2R/DRD2 (Dopamine Receptor D2) ELISA Kit拉丁屬名: Lentinula edodes

金龜子綠僵菌Monkey PF4 (Platelet Factor 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Metarhizium anisopliae

硫化物氧化假諾卡氏菌Monkey MUC4 (Mucin 4) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudonocardia sulfidoxydans

金黃色葡萄球菌Monkey F13B (Coagulation Factor XIII B Polypeptide) ELISA Kit 拉丁屬名: Staphylococcus aureus subsp.

擬莖點霉Monkey IGF2R (Insulin Like Growth Factor 2 Receptor) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

墨汁鬼傘Monkey CCL14 (Chemokine C-C-Motif Ligand 14) ELISA Kit 用途: 墨汁鬼傘可食用，但也有人食后。尤其與酒或啤酒同食均可引起。據(jù)記載此種還有腐胺(putrescine)。此菌可藥用，、、、。子實體煮熟后烘干，研成細末和醋成糊狀敷用，治無名腫毒和其他瘡疽。試驗，對小白鼠180 和艾氏癌的高達100%。

高加索鏈霉菌Monkey PGD2S (Prostaglandin D2 Synthase, Brain) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

微膠鐮孢Monkey CSF (Colony Stimulating Factor) ELISA Kit用途: 藥用植物內(nèi)生菌

香菇Monkey TSA (Thyroid Stimulating Antibody) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

大腸埃希菌Monkey RPL26 (Ribosomal Protein L26) ELISA Kit 拉丁屬名: coli

芽枝狀枝孢Monkey LAB7-2/CD86 (B-Lymphocyte Activation Antigen B7-2) ELISA Kit拉丁屬名: Cladosporium cladosporioides

桃干枯殼蕉孢菌Monkey MOG (Myelin Oligodendrocyte Glycoprotein) ELISA Kit用途: 植物病原物；用于該菌種群演化與流行學監(jiān)測。
卡氏住白細胞原蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 Reg3a  胰島β細胞生長因子抗體PBS-Triton去污劑標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

Annexin A1  膜粘連蛋白A1抗體石當歸素4-(3-chloro-2-hydroxy-3-methylbutoxy)-7H-furo[3,2-g]chromen-7-one化學標準品 分 子 式: C16H15O5Cl 分 子 量: 322.7403

SynaptotagminVI  突觸蛋白6抗體氧代表千金藤默星堿Oxoepistephamiersine化學標準品 分 子 式: C21H25NO7 分 子 量: 403.4257

XRCC4  X射線修復交叉互補蛋白4抗體13-羥基羽扇豆鹼7,14-Methano-2H,11H-dipyrido[1,2-a:1',2'-e][1,5]diazocin-11-one,dodecahydro-2-hydroxy-, (2S,7S,7aR,14S,14aS)-化學標準品 分 子 式: C15H24N2O2 分 子 量: 264.36326

NLRX1/NOD26/NOD9  膜內(nèi)在蛋白NOD26抗體粗毛淫羊藿苷Acuminatin對照藥材 分 子 式: C21H24O4 分 子 量: 340.41286

MSX1  MSH同源蛋白1樣蛋白抗體丁香樹脂醇雙葡萄糖苷Syringaresinol-di-O-glucoside中藥標準品  分 子 式: C34H46O18 分 子 量: 742.71824

NIR1/RDGBA3  膜相關(guān)磷脂轉(zhuǎn)運蛋白抗體西貝母堿IMPERIALINE中藥標準品  分 子 式: C27H43NO3 分 子 量: 429.64