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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
灰馬杜拉分枝菌探針法熒光定量PCR試劑盒
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號(hào):LZR3785
  • 價(jià)格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-13
  • 更新日期: 2025-01-21
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號(hào) LZR3785
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號(hào)
是否進(jìn)口

PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時(shí)間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

 

客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號(hào)

灰馬杜拉分枝菌探針法熒光定量PCR試劑盒

Madurella grisea

LZR3785


熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;

(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。

其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

產(chǎn)朊假絲酵母SFRP2 (Secreted Frizzled Related Protein 2) ELISA Kit用途: 飼料發(fā)酵

靈芝(赤芝,紅靈芝)LGALS3 (Lectin-Galactoside Binding Soluble 3) ELISA Kit拉丁屬名: Ganoderma  lucidium

德斯霉F9 (Coagulation Factor Ⅸ) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

栗疫菌βMSH (beta-Melanocyte Stimulating Hormone) ELISA Kit拉丁屬名: Cryphonectria parasitica

節(jié)桿菌CABIN1 (Calcineurin Binding Protein 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Arthrobacter sp.

釀酒酵母MAPK14 (Mitogen Activated Protein Kinase 14) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae

籃狀菌屬Pax (Paxillin) ELISA Kit拉丁屬名: Talaromyces sp.

李氏擬諾卡氏菌EAR12 (Eosinophil Associated Ribonuclease A family Member 12) ELISA Kit拉丁屬名: Nocardiopsis listeri

淡紫擬青霉菌GDF15 (Growth Differentiation Factor 15) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

大腸桿菌PTGIS (Prostaglandin I Synthase) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

雅致放射毛霉α1-AGP (Alpha-1-Acid Glycoprotein) ELISA Kit

拉丁屬名: Actinomucor  elegans

香菇Bcl-3 (B-cell Leukemia/Lymphoma 3) ELISA Kit 用途: 食用、藥用

平凡假單胞菌PLVAP (Plasmalemma Vesicle Associated Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas  trivialis

莖點(diǎn)霉屬 PDGFRL (Platelet Derived Growth Factor Receptor Like Protein) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

簇生離褶傘CDX2 (Caudal Type Homeobox Transcription Factor 2) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
灰馬杜拉分枝菌探針法熒光定量PCR試劑盒 ERM/Etv5  轉(zhuǎn)錄因子Ets差異基因5抗體(-)-扁柏脂素,蓽澄茄內(nèi)脂2(3H)-Furanone,3,4-bis(1,3-benzodioxol-5-ylmethyl)dihydro-, (3R,4R)-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C20H18O6 分 子 量: 354.35332

UGCG/Ceramide glucosyltransferase  葡萄糖神經(jīng)酰胺合成酶抗體原釩酸鈉溶液(NaVO4,0.1mol/L)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

ACTBL1/Ovary  卵巢、胎盤、、睪丸蛋白22抗體去氧脫水穿心蓮內(nèi)酯2(5H)-Furanone,3-[2-[(1R,4aS,5R,6R,8aS)-decahydro-6-hydroxy-5-(hydroxymethyl)-5,8a-dimethyl-2-methylene-1-naphthalenyl]ethyl]-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C20H30O4 分 子 量:

C9orf72  9號(hào)染色體開放閱讀框72抗體阿多尼弗林堿2H-1a,5-Methano-4H-oxireno[12,13][1,5,10]trioxacyclotetradecino[6,7,8-gh]pyrrolizine-6,15(5H,15aH)-dione,7a,8,9,11,12b,13-hexahydro-5-hydroxy-4,15a-dimethyl-, (7aR,12bR)-中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C18H23NO7 分 子 量:

TAS2R7/T2R6  味覺感受器蛋白T2R6抗體Lup-20(29)-en-28-oic acid, 3-[β-D-glucopyranosyl(1→4)[a-L-rhamnopyranosyl) (1→2)-a -L-arabinopyranosyl]oxy], (3β,4a)-)Lup-20(29)-en-28-oic acid,

3-[(O-6-deoxy-a-L-mannopyranosyl-(1?2)-O-[b-D-glucopyranosyl-(1?4

)]-a-L-arabinopyranosyl)oxy]-, (3b)-中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C47H76O16 分 子 量:

Annexin I  膜粘連蛋白 I抗體二羥丙茶堿ACoronarin A對(duì)照藥材 分 子 式: C20H28O2 分 子 量: 300.43512

GPR70/T1R1  蛋白偶聯(lián)受體70抗體人參皂苷Rk2Ginsenoside RK2中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C36H60O7 分 子 量: 604.8574

 


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