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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
羅布羅布芽生菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書
  • 品牌:聯祖
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:LZR3779
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-13
  • 更新日期: 2025-01-21
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 聯祖
貨號 LZR3779
用途 公司產品僅用于科研
包裝規格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產品名稱

英文名稱

貨號

羅布羅布芽生菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

Loboa lobai

LZR3779

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環步驟

溫度

時間

循環數

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產品:

橙色單胞菌IL-1β (Interleukin 1 Beta) ELISA Kit 拉丁屬名: Aurantimonas sp.

糞產堿桿菌*IL-6 (Interleukin 6) ELISA Kit拉丁屬名: Alcaligenes Faecalis Caslani et Chalmers

旱生紅曲霉RETN (Resistin) ELISA Kit 拉丁屬名: Monascus eremophilus

空腸彎曲桿菌D2D (D-Dimer) ELISA Kit拉丁屬名: jejuni

熒光假單胞桿菌ACE (Angiotensin I Converting Enzyme) ELISA Kit用途: 無機磷細菌肥料

大腸埃希菌F1+2 (Prothrombin Fragment 1+2) ELISA Kit拉丁屬名: coli

金針菇—金白1號GSH-Px (Glutathione peroxidase) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

Actinomadura amylolyticaGLP-1 (Glucagon Like Peptide 1) ELISA Kit拉丁屬名: Actinomadura amylolytica   sp/ nov/

糙皮側耳ALP (Alkaline Phosphatase) ELISA Kit拉丁屬名: Pleurotus ostreatus

小麥蒼白桿菌β Manase ELISA Kit拉丁屬名: Ochrobactrum tritici

栗疫菌PIGR/SC (Polymeric Immunoglobulin Receptor/Membrane Secretory Component) ELISA Kit拉丁屬名: Cryphonectria parasitica

腐生葡萄球菌pIκBα (Phospho-Inhibitory Subunit Of NF Kappa B Alpha) ELISA Kit 拉丁屬名: Staphylococcus saprophyticus

豇豆慢生根瘤菌UGCG (UDP-glucose ceramide glucosyltransferase) ELISA Kit用途: 與花生共生固氮

大腸埃希氏菌PARP4 (Poly ADP Ribose Polymerase 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Escherichia coli

耶爾森氏菌FLOT2 (Flotillin 2) ELISA Kit拉丁屬名: Yersinia sp.
羅布羅布芽生菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書phospho-CstF64(Ser498)  磷酸化細胞分裂相關蛋白CSTF64抗體赤式-2-(4-烯丙基-2,6-二甲氧基苯氧基)-1-(4-羥基-3-甲氧基苯基)-丙烷-1-醇(+)-erythro-(7R,8S)-delta8'-4,7-dihydroxy-3,3',5'-trimethoxy-8-O-4'-neolignan化學標準品 分 子 式: C21H26O6 分 子 量: 374.428

Hemoglobin Beta  血紅蛋白β抗體蠟果楊梅酸 COlean-12-en-28-oic acid,

3,27-bis[[(2E)-3-(3,4-dihydroxyphenyl)-1-oxo-2-propenyl]oxy]-, (3b)-對照藥材 分 子 式: C48H60O10 分 子 量: 796.984

Desmuslin  中間絲蛋白β-synemin抗體7-O-甲基白楊素中藥標準品  分 子 式:  分 子 量:

G Protein alpha Inhibitor 1  G蛋白α抑制蛋白1抗體去氫丹參酮IIAPhenanthro[1,2-b]furan-10,11-dione,6,7-dihydro-1,6,6-trimethyl-化學標準品 分 子 式: C19H16O3 分 子 量:

DSPP/Dentin phosphophoryn  牙本質磷蛋白抗體甘草查爾酮B2-Propen-1-one,3-(3,4-dihydroxy-2-methoxyphenyl)-1-(4-hydroxyphenyl)-, (2E)-中藥標準品  分 子 式: C16H14O5 分 子 量: 286.27936

Cathepsin S  組織蛋白酶S抗體蕎麥堿3,4-Piperidinediol,2-(hydroxymethyl)-, (2R,3R,4R)-中藥標準品  分 子 式: C6H13NO3 分 子 量: 147.17232

IGF2BP2/IMP2  樣生長因子ⅡmRNA結合蛋白2抗體托品醇壬酸酯Nonanoic acid,8-methyl-8-azabicyclo[3.2.1]oct-3-yl ester, endo- (9CI)化學標準品 分 子 式: C17H31NO2 分 子 量: 281.43354


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