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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
牛捻轉胃蟲探針法熒光定量PCR試劑盒說明書
  • 品牌:聯祖
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:LZR3803
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-13
  • 更新日期: 2025-01-20
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 聯祖
貨號 LZR3803
用途 公司產品僅用于科研
包裝規格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產品名稱

英文名稱

貨號

牛捻轉胃蟲探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

Mecistocirrus digitatus

LZR3803

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環步驟

溫度

時間

循環數

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產品:

普雷恩毛霉PDGFC (Platelet Derived Growth Factor C) ELISA Kit 拉丁屬名: Mucor  prainii

鉤狀木霉GasR (Gastrin Receptor) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

酮丁梭菌凍干粉  金黃色葡萄球菌(陽性)D4R/DRD4 (Dopamine Receptor D4) ELISA Kit 拉丁屬名: 凍干粉  金黃色葡萄球菌(陽性)

豌豆根瘤菌α1BG (Alpha-1-B-Glycoprotein) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

嗜熱毀絲霉FOXO1 (Forkhead Box Protein O1) ELISA Kit拉丁屬名: Myceliophthora  thermophila

沖擊地土地桿菌FGL2 (Fibrinogen Like Protein 2) ELISA Kit拉丁屬名: Pedobacter  alluvionis

提純禽型結核菌素MDC/CCL22 (Macrophage Derived Chemokine) ELISA Kit規格: 5ml/50頭份/2500IU

臘狀芽胞桿菌CNP (C-type Natriuretic Peptide) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

假單胞菌LFA-1 (Lymphocyte Function Associated Antigen 1) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas  sp.

易變鏈霉菌CLA (Collagen Autoantibody) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces mutabilis

釀酒酵母SOX9 (Sex Determining Region Y Box Protein 9) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae

灰橙鏈霉菌CCL4L1 (Chemokine C-C-Motif Ligand 4 Like Protein 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces griseoaurantiacus

pY26TEF-GPD@1IL-12 p40 (Interleukin 12 p40) ELISA Kit拉丁屬名: 宿主:DH5α,BL21

球孢白僵菌LRG1 (Leucine Rich Alpha-2-Glycoprotein 1) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

松針散斑殼SNCγ (Synuclein Gamma) ELISA Kit拉丁屬名: Lophodermium pinastri
牛捻轉胃蟲探針法熒光定量PCR試劑盒說明書CDK5RAP1  CDK5激活結合蛋白1抗體P:C(25:24,pH﹤5.0)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

CDK5RAP2  CDK5激活結合蛋白2抗體山楂酸Maslinic acid中藥標準品  分 子 式: C30H48O4 分 子 量: 472.70

CINP  CDK2相互作用蛋白抗體粘毛黃芩素 III 四乙酸酯Viscidulin III tetraacetate對照藥材 分 子 式:  分 子 量:

CDK14/PFTK1  周期蛋白依賴性激酶14抗體松脂醇二葡萄糖苷Pinoresinol diglucoside中藥標準品  分 子 式: C32H42O16 分 子 量: 682.67

RGC32  補體應答基因32抗體10-羥基-6-鐵屎米酮6H-Indolo[3,2,1-de][1,5]naphthyridin-6-one,10-hydroxy-化學標準品 分 子 式: C14H8N2O2 分 子 量: 236.22552

CKI γ3  酪蛋白激酶1γ3抗體百秋李醇Patchouli alcohol中藥標準品  分 子 式: C15H26O 分 子 量: 222.37

AKIRIN1  AKIRIN1蛋白抗體富馬酸二甲酯(E)-Dimethyl fumarate化學標準品 分 子 式: C6H8O4 分 子 量: 144.12532


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