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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3899
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-17
- 更新日期： 2025-01-20
| 產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3899 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
皮諾卡菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書 | Nocardia farcinica | LZR3899 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質粒載體為本領域常規(guī)質粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
北里胞菌VEGFR-2/KDR (Vascular Endothelial Growth Factor Receptor 2) ELISA Kit拉丁屬名: Kitasatosporia sp.
海南根瘤菌ATF-5 (Activating Transcription Factor 5) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizobium hainanense
溴敵隆對照液IL-1R2 (Interleukin 1 Receptor Type II) ELISA Kit規(guī)格: 1mg/ml×1ml
隆紋黑蛋巢PCIII (Procollagen III) ELISA Kit拉丁屬名: Cyathus striatus
福氏志賀氏菌OFQ/N (Orphanin FQ/Nociceptin) ELISA Kit拉丁屬名: Shigella flexneri
釀酒酵母IL-6R (Interleukin 6 Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
早熟禾鐮孢PRCP (Prolylcarboxypeptidase) ELISA Kit 拉丁屬名: Fusarium poae
黃海海桿狀菌MTL (Motilin) ELISA Kit拉丁屬名: Marinobacter flavimaris
暗擬莖點霉GSANA (Granulocyte Specific Anti-Nuclear Antibody) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
水 堿菌TPPP (Tubulin Polymerization Promoting Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Alcaligenes faecalis subsp. faecalisAlcaligenes aquatilis
腐皮鐮孢FP (Prostaglandin F Receptor) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
米曲霉疏展變種ERK3 (Extracellular Signal Regulated Kinase 3) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus oryzae var. effusus
平臍蠕孢菌EG-VEGF/PK1 (Endocrine Gland Derived Vascular Endothelial Growth Factor)ELISA Kit 用途: 研究
鞘氨單胞菌TSP1 (Thrombin Sensitive Protein 1) ELISA Kit拉丁屬名: Sphingomonas sp.
Massilia namucuonensisGMFβ (Glia Maturation Factor, Beta) ELISA Kit 拉丁屬名: Massilia namucuonensis
皮諾卡菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書INTS3 集成復雜蛋白亞單位3抗體
C10orf4/FRA10AC1 10號染色體開放閱讀框4抗體
C10orf47 10號染色體開放閱讀框47抗體
C10orf62 10號染色體開放閱讀框62抗體
C10orf81 10號染色體開放閱讀框81抗體
C10orf88 10號染色體開放閱讀框88抗體
C10orf93 10號染色體開放閱讀框93抗體
